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变异链球菌srtA基因多态性对转肽酶A活性和细菌粘附的影响

庄沛林  于丽霞  邱荣敏  陶冶  林焕彩  
【摘要】:目的本课题组前期研究发现变异链球菌(简称变链菌)sortase A (srtA)基因多态性与儿童龋易感性相关,5a基因型srtA基因(含T168G,A176G和A671C错义突变,记为srtA(5a))在高龋组中的分布频率高于无龋组。本实验研究srtA(5a)对SrtA酶活性和变形链球菌粘附能力的影响。方法以变链菌UA159为模板,通过同源重组构建含srtA(5a)基因型的突变株变链菌srtA(5a)。分别表达变链菌UA159和变链菌srtA(5a)的SrtA酶蛋白,分别记为SrtA_(△N40(5a))和SrtA_(△N40(UA159)),以Dabcyl-QALPNTGEE-Edans为底物进行酶动力学实验,基于米氏方程计算酶动力学常数。运用试管法采用紫外分光光度计评估srtA(5a)对对细菌粘附的影响。结果 SrtA△N40(5a)的催化速率常数和催化效率均低于SrtA_(△N40(UA159)),变链菌srtA(5a)的细菌粘附比例低于变链菌UA159。结论 srtA基因错义突变可以抑制SrtA酶活性和变链菌粘附。

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