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MicroRNAs在牙髓细胞成牙本质向分化过程中的差异表达及作用

蒋宏伟  王润夫  龚启梅  林正梅  凌均棨  
【摘要】:目的:牙髓细胞(DPCs)的成牙本质向分化是产生修复性牙本质的重要步骤,已知众多信号通路参与了这一过程。MicroRNAs(miRNAs)是一类非编码蛋白质的微小RNA,参与包括细胞的分化调控的众多生理病理过程。本实验旨在研究MicroRNAs在DPCs成牙本质向分化过程中所扮演的角色,以期进一步了解成牙本质细胞分化的具体调控机制。方法:通过获取外科拔除的健康阻生磨牙牙髓细胞进行原代培养,传代后进行矿化诱导使其成牙本质向分化。使用高通量miRNA芯片(microarray)技术得到矿化培养14天的矿化组和对照组MicroRNAs表达谱,筛选出两组间差异表达的MicroRNAs,并用qRT-PCR技术验证microarray结果。应用生物信息学方法预测筛选出的MicroRNAs的靶基因及可能涉及的信号通路。结果:在分析比较MicroRNAs的表达谱后,共发现22种MicroRNAs的表达存在差异,其中12种表达上调,10种的表达下调。接下来的qRT-PCR试验中,进一步的确认其中9种MicroRNAs的差异表达。生物信息学分析发现这些MicroRNAs的靶基因参与多种信号通路,其中MAPK,Wnt和Apoptosis信号通路尤为值得注意。结论:该研究发现DPCs成牙本质向分化诱导过程中MicroRNAs存在差异性表达,并且其调节的靶基因可能参与和矿化有重要联系的MAPK,Wnt,Apoptosis信号通路,提示它们可能参与了成牙本质向的调控,为进一步研究修复性牙本质形成机制和牙齿再生提供了依据。

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