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防龋基因疫苗pVAX1-SPG免疫BALB/c小鼠的实验研究

王怡丹  刘建国  姜晶  王伟  亓鹏  白朋元  管晓燕  
【摘要】:目的:观察变异链球菌防龋基因疫苗pVAX1-SPG经肌肉注射、颌下腺周围区域皮下注射,鼻腔粘膜滴注三种途径免疫BALB/c小鼠后的特异性免疫反应,并观察重组质粒pVAX1-SPG目的基因的原位表达。方法:将40只BALB/c小鼠随机分为5组,分别以重组质粒pVAX1-SPG经肌肉、颌下腺周围区域皮下注射、鼻腔粘膜滴注三种途径免疫小鼠及pVAX1质粒肌肉注射和生理盐水鼻腔滴注免疫小鼠,间接ELISA法检测血清和唾液中特异性抗体水平的动态变化和动物的一般安全性检测,并以免疫组化技术观察目的基因在肌肉、颌下腺和鼻腔粘膜的原位表达。结果:免疫后小鼠唾液IgA型特异性抗体和血清IgG型特异性抗体均明显升高;并持续数周。且鼻腔粘膜滴注组比肌肉、颌下腺周围区域皮下注射组诱导唾液IgA型特异性抗体要早;各实验组小鼠重要脏器均未检测到异常病理变化;在小鼠的股四头肌、颌下腺及鼻腔粘膜检测到目的蛋白的表达。结论:基因疫苗pVAX1-SPG能诱导BALB/c小鼠外分泌液和血液中特异性抗变形链球菌表面蛋白和葡聚糖结合蛋白抗体的产生;pVAX1-SPG对动物的安全性指标无明显影响:pVAX1-SPG在动物体内能够正确表达;鼻腔粘膜免疫可能是简便有效的免疫途径。

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