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COX-2抑制剂塞来昔布增强CDDP对人舌鳞癌Tca8113细胞的生长抑制作用的体内、体外实验研究

李伟忠  丁彦青  王小燕  李祖国  张进华  
【摘要】:目的:通过体外及体内实验观察COX-2抑制剂塞莱昔布与顺铂联合应用后对人舌鳞癌Tca8113细胞生长抑制的作用。方法:Tca8113细胞分别加入含有不同浓度的塞来昔布、CDDP培养液,采用噻唑蓝法(MTT)测定细胞OD值,计算细胞生长抑制率,光镜下观察联合用药后Tca8113细胞的形态学变化,流式细胞术检测对细胞周期的影响。将Tca8113细胞接种于裸鼠皮下,分别给以口服生理盐水、塞来昔布,腹腔注射顺铂等,35天后处死裸鼠,测移植瘤质量,计算抑瘤率,光镜及电镜观察裸鼠移植瘤组织形态学及细胞超微结构变化,免疫组化方法观察对COX-2蛋白表达的影响,RT-PCR检查移植瘤组织COX-2 mRNA的表达。结果:小剂量的塞来昔布(10μmol/L)增强CDDP对Tca8113细胞生长抑制及阻滞细胞周期进程的作用。Tca8113细胞裸鼠移植瘤观察发现,塞来昔布+CDDP组移植瘤生长明显慢于对照组及单用药物组,析因方差分析结果证实,塞来昔布和CDDP抑制裸鼠Tca8113细胞移植瘤生长的主效应均有统计学意义(P=0.000),二者交互作用显著(P=0.001),光镜及电镜观察见:塞来昔布+CDDP组则可见到肿瘤细胞大片凝固性坏死,并可见较多的凋亡细胞,免疫组化染色及RT-PCR结果证实,塞来昔布与CDDP联合应用能增强抑制COX-2蛋白表达,而对COX-2 mRNA的抑制作用较弱,提示COX-2抑制剂塞来昔布对COX-2酶的作用主要在抑制酶的活性。结论:小剂量的塞来昔布即可增强CDDP对Tca8113细胞的杀伤作用,塞来昔布单独应用,虽然与对照组相比其抑制Tca8113细胞裸鼠移植瘤生长的作用有显著性意义,但其抑制肿瘤生长的作用仍然较弱;其与CDDP联合应用后,抑制裸鼠移植瘤的生长有显著性意义,两者在抑制移植瘤生长方面有交互增强的作用。

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