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NF-κB信号转导通路与口腔鳞癌转移关系的研究

严明  张萍  张志愿  关呈超  陈万涛  
【摘要】:目的:检测NF-κB信号转导通路与头颈鳞癌侵袭和转移的机制,从而判断其作为头颈鳞癌的早期诊断和治疗提供新的分子靶标的可能。方法:应用实时定量PCR验证不同转移潜能口腔鳞癌细胞系Tca8113和Tb中的差异表达基因。Western blot、luciferase报告基因和EMSA法体外分析低转移潜能口腔鳞癌细胞系TSCC、Tca8113和高转移潜能Tb、Tca8113-M、OSC-4细胞系的NF-κB通路活性。选取临床病理证实的淋巴结未转移和已转移的口腔鳞癌及其配对淋巴结转移灶标本,应用免疫组织化学法分析p65蛋白的核内表达。结果:①实时定量PCR检测Tca8113和Tb细胞中9个基因的转录情况,其中上调6个,下调1个,2个基因无明显差异,与芯片结果符合率为66.7%。其中NF-κB通路相关基因A20、IκBα、TANK、p65表达明显上调。②Westernblot显示高转移Tb、Tca8113-M细胞IκBα和p65磷酸化水平较高,对TNFα刺激更加敏感。Luciferase报告基因法和EMSA显示高转移细胞NF-κB通路高水平激活,与低转移细胞之间存在明显差异(P0.01)。③口腔鳞癌标本中p65在未转移鳞癌、已转移鳞癌和其配对的淋巴结转移灶中核阳性率分别为22.6%,52.2%和60.7%,三组之间差异有明显统计学意义(x2=37.489,df=2,P=0.001)。结论:NF-κB通路在高转移口腔鳞癌中处于高水平激活状态,可能在其侵袭和转移中发挥重要作用。NF-κB和其上下游的信号受体可能可以作为口腔鳞癌转移早起诊断和治疗的分子靶标。

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