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壳聚糖酶高产菌株的筛选、鉴定及基因的克隆和表达研究

孙玉英  张继泉  王淑军  
【摘要】:正从连云港海滩晒虾蟹壳的泥土里筛选出一株产壳聚糖酶能力较高的菌株S-1。根据其形态特征、生理生化以及16S rDNA(GenBank accession:EU817042)鉴定,初步认定该菌为芽孢杆菌属(Bacillus);经过发酵条件优化实验,确定该菌的最佳培养基配方为(g/L):虾蟹壳粉15,硝酸铵10,酵母提取物3,K_2HPO_4·3H_2O 1.4,NaCl 5,MgSO_4·7H_2O 1.4,葡萄糖1.0;最适宜培养条件为初始pH 6.0,32℃,用500ml三角瓶装液量为100 ml,发酵时间为72h,最终该菌的酶活力由复筛的2.13U/ml提高到6.4U/ml。通过设计兼并引物,以菌体DNA

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