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体内淋巴细胞微核试验在肺、肠癌患者术前检测中的意义

马国建  陈森清  李金田  许林  刘蓉  
【摘要】:目的:肿瘤的复发与转移是造成患者死亡的重要原因,寻找简便合适的生物标志物检测,在患者治疗前了解或预测病情的恶性程度,将对肿瘤的后续治疗有明确的指导意义,本组研究随机抽取了两组肺、大肠癌手术前或手术后未经任何治疗的患者,采用人外周血体内淋巴细胞微核测试法,探讨了患者体内自发淋巴细胞微核形成与肿瘤恶性分化与转移的关系。方法:无菌采集到有效肿瘤外周血样本(术后经病理确诊的肿瘤病例)共237份。其中肺癌69份,男54例;女15例;年龄34~75岁;大肠癌168份,男126例,女63例;年龄26~85岁。另收集到21例良性大肠病变病例;阴性对照采用已获取的自然人群。新鲜肝素抗凝外周血立即进行微核制片。用200μl加样器取抗凝全血0.1ml,加入到0.5 ml硅化Tip管。再加入0.05ml新鲜配制生理盐水为溶剂的3%明胶(37℃水浴中溶解,),混匀、无气泡后,竖直放入37℃水箱中孵浴45min,吸上清于另一0.5ml Tip管内,离心,微量沉淀物用震荡器混匀,用10μl加样器吸出,推片,风干,100%甲醇固定1min,1:10Giemsa染色,油镜下每例样本计数2000个完整淋巴细胞,记录微核细胞数,以‰表示。结果:结果显示237例病理确诊的肺、肠癌患者的平均MNF,和自然人群对照组比较,各类癌患病组P值均0.01,呈现极显著差异;良性病变组与自然人群组之间无显著性差异(P0.05)。以良性大肠病变组为对照,把肠癌患者按分化程度分组,比较组间MNF的差异,结果表明,随着分化度降低,MNF逐渐呈剂量依赖性上升,并且低分化组与其它分化组之间,MNF差异出现显著性(P0.01),用患癌组平均MNF1.69‰为对照,与癌转移患者比较MNF差异,发现癌症转移患者平均MNF明显高于对照组,肺癌转移组差异显著(P0.05=,肠癌组呈极显著差异(P0.01 =。结论:肺、大肠癌患者体内淋巴细胞MNF的高低,反映了其肿瘤恶性程度的大小,患者淋巴体内细胞微核形成与肺、大肠癌分化与转移密切相关。肿瘤患者自发微核是诱变物质经代谢、活化等多途径体内过程后形成微核的结果,反映了机体的遗传不稳定或恶性程度改变。因此人体内微核实验更能真实并直接了解致癌因子与人体易感因素相互作用的体内过程,可综合反映致癌剂对人体细胞造成的诱变效应以及人体对异常细胞的清除能力,这为癌者患者的术前恶性程度判断和高危人群筛查提供了一个有用的生物学标志物。

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