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BPDE与NiS转化的16HBE恶性细胞系的建立及其生物学特性研究

宾晓农  谭敏  吕嘉春  纪卫东  陈家堃  蒋义国  
【摘要】:目的:探讨用BPDE和NiS转化的16HBE恶性细胞系BPDE-16HBE和NiS-16HBE的致癌性和转移潜能,并鉴定其生物学差异。方法:应用单个细胞克隆技术分离建立BPDE、NiS转化的16HBE恶性细胞株BPDE-16HBE和NiS-16HBE;基因芯片技术检测BPDE-16HBE和NiS-16HBE细胞株基因差异表达种类和数量;RT-PCR法分析E-cadherin的mRNA的表达和E-cadherin启动子甲基化状况;MTT法、平板法、boyden小室法、细胞染色体分型法以及动物实验检测BPDE-16HBE和NiS-16HBE细胞株的体内外生物学特征。结果:①成功分离建立了具有转移能力的BPDE-16HBE和NiS-16HBE恶性细胞系;②基因芯片技术检测BPDE-16HBE和NiS-16HBE恶性细胞系,呈现差异表达的基因数量有22个,其中11个(50%)下调,另11个(50%)上调;③BPDE-16HBE恶性细胞系E-cadherin的mRNA的表达水平低于NiS-16HBE恶性细胞系,E-cadherin启动子甲基化高于NiS-16HBE恶性细胞系;④BPDE-16HBE恶性细胞系的体外增殖能力、克隆形成率和体外侵袭性较NiS-16HBE恶性细胞系高;⑤BPDE-16HBE恶性细胞系体内成瘤性和转移性较NiS-16HBE高;⑥BPDE-16HBE和NiS-16HBE恶性细胞系染色体众数比较无差异。结论:BPDE-16HBE和NiS-16HBE恶性细胞系具有不同的生物学特性和分子生物学特性;BPDE-16HBE恶性细胞系高致癌性和转移潜能可能与E-cadherin的mRNA的表达水平低,而E-cadherin启动子高甲基化有关。

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