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栓菌420漆酶基因的克隆及其在Pichia pastoris的高效表达

洪宇植  周宏敏  李剑凤  肖亚中  
【摘要】:正采用简并引物和长距离反向PCR(LD-IPCR),以栓菌420(Trametes sp.420)的基因组为模板,克隆得到一新的漆酶同工酶基因lacD。该基因开放读码框长2052bp,含有8个内含子。lacD序列与其它担子菌来源的漆酶具有较高的一致性,而与植物、细菌和昆虫漆酶的一致性均低于25%。lacD cDNA长1575bp,编码一498aa的成熟蛋白多肽,信号肽序列长23aa。将编码成熟蛋白的lacD cDNA序列以两种方式克隆到pPIC9K载体上并在毕赤

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