一株高产铁载体菌的筛选鉴定及其产铁载体性质研究

【摘要】：本文改进了产铁载体细菌平板检测法,使其对高产铁载体菌的检测更为敏感。用改进后的CAS检测平板对东湖的产铁载体菌进行筛选,得到了一株高产铁载体菌。用CAS-Assay 测定它合成铁载体的量,发现铁载体量最高时A／At可达0．06,暂命名为sp-f。对其用Biolog 检测板进行快速鉴定,结合传统细菌分类鉴定方法,和其16srRNA测序结果的BLAST分析, 确定sp-f为一株荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)。进一步研究了该菌在MKB丰富培养基中分泌铁载体和生长的相关性,发现其合成分泌铁载体在对数生长前期达到峰值后溶液中铁载体浓度不再随着细菌生长继续增大,反而会渐渐减少;进入稳定期后,铁载体含量开始慢慢降低。此外,结合高效液相色谱(HPLC)的方法对在GASN培养基中不同铁浓度生长下的 Pseudomonas fluorescens AB92001(CCTCC) 与Pseudomonas fluorescens sp-f所分泌的铁载体进行了分离和相对浓度测定。比较了模式菌株与分离得到的高产菌所分泌铁载体的差别与对环境铁浓度变化的应答能力。