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cyclinE和P27~(kip1)在不同时段增生性瘢痕的表达及与细胞周期的相关性探讨

唐红梅  王达利  张学军  金文虎  邵蔚  邹安芳  
【摘要】:目的探讨不同时段增生性瘢痕(hypertrophic scar,HS)成纤维细胞(fibroblast,FB)细胞周期相关基因cyclinE和P27~(kip1)基因及蛋白的表达与FB实际所处的细胞周期进行的相关性,为基因干扰治疗用于HS的防治提供前期研究基础。方法手术切取32例HS组织,根据临床诊断及瘢痕形成的不同时间分为四组:3个月,6个月,1年及2年组,利用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)技术,观察不同阶段HS中cyclinE和P27(kip1)的mRNA表达,用蛋白电泳(Western-Blot)技术观察二者的蛋白表达水平,流式细胞术检测各个阶段HS中FB的细胞周期情况。结果 (1)RT-PCR实验结果:随着HS的发展,FB中cyclinE的表达强度呈由强至弱的变化;而P27(kip1)的表达早期明显低于晚期。两者3个月组及6个月组分别与1年组、2年组比较差异有统计学意义(P0.05);前者3个月组与6个月组比较差异有统计学意义(P0.05)。(2)Western blotting实验结果:cyclinE,P27(kip1)蛋白表达在3个月组与6个月组比较,差异有统计学意义(P0.05)。3个月组、6个月组HS的FB中cyclinE蛋白表达量明显高于1年及2年组,有统计学意义(P0.05)。P27(kip1)在3个月组、6个月组HS中的蛋白表达量明显低于1年及2年组,有统计学意义(P0.05)。(3)流式细胞仪检测结果:3个月组、6个月组HS的FB多数处于S期;而1年及2年组的HS的FB多处于G0/G1期。结论随着HS的发展,FB中CyclinE的mRNA和蛋白的表达强度呈由强至弱的变化,P27(kip1)的mRNA和蛋白的表达则呈由弱至强的变化。不同时期HS的FB中CyclinE和P27(kip1)各自的mRNA和蛋白的表达趋势基本一致,而且不同时期HS中的细胞成分的细胞周期分布与这两个蛋白所执行的功能情况相对应;在HS发生早期对这两个基因进行干预,有可能会较好控制HS的发生及发展。

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