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脊柱手术出血中间充质干细胞数变化的研究

叶彬  覃建朴  蔡玉强  张军  廖文波  
【摘要】:目的探讨脊柱手术出血分离骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells BMMSCs)的可行性及BMMSCs数与时间段和年龄的关系,为脊柱手术出血中BMMSCs的提取再利用打下基础。方法采用percoll分离液密度梯度离心法分离脊柱手术不同时段(0~5min、5~10min、10~15min)椎骨出血血液标本中单个核细胞(MNC),用含10%的胎牛血清的低糖DMEM培养液体外培养3d后全量换液除去未贴壁细胞、苏木素原位染色。结果密度梯度离心法结合贴壁分离筛选法能成功分离出脊柱手术骨出血中的BMMSCs;手术中椎骨出血0~5min时间段的BMMSCs数为262.47±172.20,5min以后的出血中的BMMSCs极少甚至没有。结论骨科脊柱手术中0~5min时间段的椎骨出血能成功分离出BMMSCs,可作为BMMSCs获取来源:0~5min时间段组血液标本中的BMMSCs数随年龄增长而减少。

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