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哈蟆油对雌性衰老大鼠肝脏组织p16,p21和cyclinD1蛋白表达的影响

姚晖  姜晓刚  梁磊  梁颖  黄志恩  张继平  邓虹珠  
【摘要】:目的:探讨哈蟆油(OR)对D-半乳糖所致雌性衰老大鼠肝脏组织p16、p21和cyclinD1蛋白表达的影响,进一步探讨OR延缓雌性大鼠机体衰老机制。方法 SPF级SD雌性青年大鼠40只随机分为模型组(D-gal组)、维生素E(VE组)、哈蟆油高剂量组(OR-H组)、中剂量组(OR-M组)、低剂量组(OR-L组),每组8只,D-半乳糖颈背部皮下注42d,建立亚急性衰老模型。另取雌性青年大鼠8只,同样部位每日注射生理盐水,作为空白组。第3周开始灌胃给药,给药时间30天。给药结束后,免疫组化法检测衰老大鼠肝脏组织p16和p21蛋白的表达情况,免疫印迹法(Western blotting)检测OR对雌性衰老大鼠肝脏组织cyclinD1表达的影响。结果雌性衰老大鼠肝脏组织免疫组化结果表明,p16和p21多为胞浆表达,弥漫性、灶性分布均有。D-gal组p16和p21阳性细胞积分与空白组比较升高,差异有显著性(P0.01)。与D-gal组相比,OR-M和OR-L组,p16阳性细胞积分降低,差异有显著性(P值均0.01),OR各剂量组p21阳性细胞积分降低,差异有显著性(P值均0.01)。肝脏组织Westernblotting结果表明,D-gal组肝脏组织cyclinD1蛋白表达与空白组比较降低,差异有显著性(P0.01)。OR各剂量组cyclin D1蛋白表达与D-gal组比较,表达均升高(P值均0.01),OR-H组尤为明显。结论 OR可降低肝脏组织p16、p21蛋白的高表达。同时显著提高细胞增殖正性调控因子cyclinD1蛋白的表达,促进衰老雌性大鼠肝细胞增殖。哈蟆油延缓雌性衰老作用可能通过调控肝脏p16,p21,cyclinD1信号通路来促进有关增殖调控蛋白表达发挥延缓衰老作用。

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