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三七总皂苷抑制心肌细胞凋亡的作用机制研究

陈少贤  刘晓颖  林秋雄  单志新  余细勇  朱杰宁  杨敏  
【摘要】:目的探讨三七总皂苷(panax notoginseng saponin PNS)对无糖无血清/缺氧诱导的心肌细胞凋亡的抑制作用。方法将心肌H9c2细胞株分为正常对照组(control),模型组(model)和PNS不同浓度(0.05g/L,0.25g/L,2.25g/L)组。control组采用含10%FBS的DMEM/F12培养基于普通二氧化碳培养箱培养,model组采用无糖无血清培养基培养,同时进行缺氧处理诱导细胞凋亡,给药组按照model组方法处理的同时给予不同浓度的PNS。细胞处理结束后收集细胞,Annexin V/PI染色后流式细胞仪检测不同浓度PNS干预后各组细胞的凋亡率。DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧的水平。Western blot检测Akt和磷酸化Akt(p-Akt)的表达水平。结果 PNS能够抑制缺血环境诱导的心肌细胞凋亡,且呈剂量依赖性。control组,model组和PNS处理组细胞凋亡率分别为8.01%±1.44%,65.71%±3.36%(vs control p0.001),65.00%±1.24%,52.51%±1.76%(vs model p0.01),23.99%±0.76%(vs model p0.001)。DCFH-DA染色结果显示model组细胞能够观察到明显的绿色荧光信号,而PNS组荧光信号与model组比较明显减弱,说明PNS具有清除ROS的作用。western blot结果显示与control组比较,model组p-Akt蛋白表达水平明显降低;与model组比较,PNS组p-Akt蛋白表达水平显著升高,而PI3K特异性抑制剂LY294002明显抑制PNS促进p-Akt表达的作用。结论 PNS通过促进p-Akt的活性从而抑制缺血诱导的心肌细胞凋亡。

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