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转座子插入法构建甲基对硫磷趋化突变株及对原位降解能力的影响

蒋建东  文阳  郭新强  陈凯  李顺鹏  
【摘要】:本文以甲基对硫磷(MP)降解菌 Pseudomonas putida DLL-1为研究材料,通过转座子随机插入突变的方式从12,000多个插入突变子中筛选得到2株在趋化平板上没有趋化圈的突变株 A3-27,a4-8,通过 SEFA-PCR 的方法克隆出被插入失活的基因片段,结果表明突变株 A3-27是编码3(β)-异丙基苹果酸脱氢酶的 leuB 基因被失活的亮氨酸营养缺陷型, 而突变子 a4-8为编码鞭毛丝状部结构蛋白基因 flic 被插入失活的趋化突变株。趋化突变株 a4-8对土壤中农药原位降解能力的研究表明,在含50mg/kg 的 MP 的灭菌与未灭菌土壤中, 趋化突变株在3d 时对 MP 的降解能力低于原始野生型菌株 DLL-1约40%,说明趋化性在农药的原位降解过程中发挥重要作用。

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