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牡丹ACS反义基因植物表达载体的构建

高水平  范丙友  刘改秀  史国安  李嘉珏  孔祥生  
【摘要】:根据GenBank登录的牡丹ACS基因DNA全长序列(FJ769773),设计一对特异性引物,在优化的PCR扩增体系的基础上,用高保真DNA聚合酶KOD-Plus从‘洛阳红'牡丹叶片总DNA中扩增出牡丹ACC合成酶基因片段PsACS-4,测序结果表明克隆序列长970bp,不包含牡丹ACS基因内含子序列,与目标序列同源性达100%;用SacⅠ和SmaⅠ对重组质粒和空载体pBI121双酶切、连接,将PsACS-4基因片段定向克隆到植物表达载体pBI121的35S启动子下游,成功构建了牡丹ACS反义基因植物表达载体。

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