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黄鳝促性腺激素释放激素受体的cDNA克隆

杨惠夷  张利红  张为民  张扬  
【摘要】:黄鳝(Monopterusalbus)具有从雌变雄的性逆转特性,是研究性别调控机制的良好模式生物。促性腺激素释放激素(Gonadotropin-releasingHormone,GnRH)是动物下丘脑合成和分泌的一种十肽激素,在动物繁殖活动的调控中起着核心作用。GnRH作用于垂体的促性腺激素(Gonadotropin,GtH)细胞,促进GtH的合成与释放,从而调控性腺的发育与活动。而且,GnRH对脑、性腺等组织也有广泛的作用。GnRH是通过特异的膜受体起作用。本文通过反转录聚合酶链式反应(reversetranscriptionpolymerasechainreaction,RT-PCR)和快速扩增cDNA末端(rapidamplificationofcDNAends,RACE)的方法,从雌性黄鳝垂体和全脑的总RNA中克隆出其促性腺激素释放激素受体(gonadotropin-releasinghormonereceptor,GnRH-R)的全长cDNA。黄鳝GnRH-RcDNA全长1534bp,开放读码框编码376个氨基酸的蛋白质。氨基酸序列分析表明这种GnRH-R属于II型GnRH-R。黄鳝GnRH-RII氨基酸序列与罗非鱼(Oreochromisniloticus)和日本青鳉(Oryziaslatipes)GnRH-RII的同源性最高,均为89%;与虹鳟鱼(Oncorhynchusmykiss)、日本鳗鲡(Anguillajaponica)、牛蛙(Ranacatesbeiana)、非洲沼蟾(Ranacatesbeiana)、鸡(Gallusgallus)和人的同源性分别是85%、84%,68%,72%,66%和62%。另外,我们也得到另一种类型GnRH-R的部分cDNA序列,序列分析表明为I型GnRH-R。我们正在克隆GnRH-RI的全长cDNA序列,并将检测两种类型GnRH-R的时空表达情况,以研究黄鳝GnRH-R基因的功能及其与GnRH的关系。

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