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貉源狂犬病病毒NeiMeng株的分离与鉴定

邵西群  闫喜军  
【摘要】:目的:鉴定并分离疯貉病原。方法:用狂犬病毒RT-PCR方法检测5只具典型神经症状的疯貉脑样品,扩增产物克隆并测序,分析病原序列。疯貉脑组织涂片荧光抗体实验验证狂犬病毒的存在,最后用乳鼠颅内接种法(MIT)分离狂犬病病毒。结果:PCR试验结果显示5只貉样品狂犬病毒检测均阳性,而犬瘟热病毒均阴性。疯貉脑组织涂片狂犬病毒荧光抗体实验阳性。比较各样品扩增的N、G基因和G-L间隔序列,结果揭示5只貉均为一株病毒感染;用乳鼠颅内接种法(MIT)分离到该株狂犬病病毒,命名为NeiMeng株。NeiMeng毒株序列用BLASTN对GenBank中序列搜索,结果显示与临近的俄罗斯、朝鲜半岛狂犬病病毒分离株同源性高,该毒株属狂犬病毒基因I型。据此诊断5个病例为貉狂犬病。与NeiMeng株序列比较,国内其他毒株核蛋白(N)编码核苷酸序列同源性在85.9%~90.2%间,糖蛋白(G)编码序列同源性在83.6%~87.7%间,NeiMeng株与国内其他毒株间序列差异较大。用N基因完整编码序列构建国内狂犬病病毒代表株的进化树,进化树显示NeiMeng株属于Arctic-like-2亚系。结论:以上证据表明在国内首次鉴定并分离到貉源狂犬病毒NeiMeng株,其与国内其他狂犬病毒病毒亲缘关系较远,而与中国东北临近的俄罗斯、朝鲜半岛狂犬病病毒分离株亲缘关系相近,是国内新发现的Arctic-like-2亚系狂犬病毒。

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