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阿魏酸钠防护晶状体上皮细胞氧化损伤及其蛋白质组学研究

严京  祁明信  黄秀榕  
【摘要】:目的:探讨阿魏酸钠(SF)防护紫外线(UV)照射诱导的人晶状体上皮细胞(HLEC)损伤的作用,寻找SF防护细胞损伤的作用机制。研究方法本研究采用SF与HLEC共同孵育,再用UV照射HLEC后,通过流式细胞仪检测,RT-PCR、western等方法探讨SF抗氧化损伤和细胞凋亡作用,并采用蛋白质组学寻找差异蛋白。研究结果:UV照射可降低细胞活性,诱发细胞凋亡和坏死。SF可提高UV照射后的HLEC细胞活性,流式细胞仪检测SF组HLEC核内的DNA含量较UV组增加,线粒体跨膜电位较UV组升高(P0.01)。SF组与UV组比较HLEC内SOD、GSH-px,CAT含量及mRNA表达均升高(P0.01)。蛋白质组学研究比较SF组与UV组得到:10个差异蛋白点;其中表达上调的差异点8个表达下调的差异点2个。并鉴定了其中3种蛋白。SF还可提高HLEC的波形蛋白表达。研究结论:SF可减轻UV照射引起的HLEC氧化损伤,提高HLEC抗氧化酶能力;SF减轻UV照射后引起HLEC凋亡的机制是通过提高HLEC核内DNA含量、降低细胞凋亡率以及通过升高线粒体跨膜电位、提高HLEC活性,减少HLEC凋亡和坏死。蛋白质组学方法鉴定出三种蛋白质参与SF防护UV照射损伤,这为进一步研究白内障发病机制提供新线索。

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