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超声联合阳离子微泡造影剂体外增强基因转染的实验研究

张清凤  王志刚  李攀  郑元义  田菊  王星  
【摘要】:目的通过自制阳离子微泡,研究超声介导其破坏增强基因转染的效果,并与普通脂质微泡做对比研究,寻找一种更可靠、完善的基因载体工具。方法采用水浴机械震荡法,加入DC-胆固醇,制备阳离子微泡,观察其物理特性,并检测其体外载基因能力。将微泡和质粒DNA以不同的处理组加入培养的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC),选择优化的辐照参数,并探讨不同微泡浓度对细胞存活率的影响,应用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,流式细胞仪检测基因转染率,MTT法分析细胞存活率。结果制备的阳离子微泡形态规整、大小分散度好,载基因率最大为39.7%。超声联合阳离子微泡能够增强基因转染,与普通脂质微泡组比差异有显著性。发现随着微泡浓度增加,细胞损伤也增大。结论自制的阳离子微泡,携基因能量强,在体外可实现较高效率的基因转染,望为基因载体技术提供新思路。

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