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胸腺素α1与复合α干扰素融合蛋白的表达及其生物学活性

刘先俊  刘方欣  黎波  周辉云  王琴琴  
【摘要】:实验旨在获得具有双重生物学活性的重组胸腺素α1(thymosin alphal,TM-α1)与复合α干扰素(IFN α-con)融合蛋白。选择大肠杆菌偏爱的密码子,将合成的 TM-α1与 IFN α-con 编码序列构成的融和基因克隆至大肠杆菌表达载体 pET-22b(+)、在宿主菌 BL21(DE3)-Codon plus-RP-X 中成功表达了可溶性融合蛋白(TM-α1-IFN-con)。表达量占总蛋白的20%以上。通过硫酸铵沉淀、疏水层析、阴离子交换层析、阳离子交换层析、分子筛层析后,产品纯度达到96 %以上。采用细胞病变抑制法测定融合蛋白的抗病毒活性,采用细胞增殖实验检测融合蛋白对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。结果表明,融合蛋白的抗病毒活性优于市售的 IFN α 1b和 IFN α 2a。对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响与市售的合成胸腺素α1相同。进一步研究证实,该融合蛋白具有良好的体外抗 HBV 作用,其体外抗 HBV 活性比联合应用 TM-α1和干扰素α强,且细胞毒性明显低于联合应用 TM-α1和干扰素α。以上结果表明,通过大肠杆菌表达的可溶性融合蛋白(TM-α1 -IFN-con),既具有良好的干扰素α抗病毒作用,也具有胸腺素α1促淋巴细胞增殖作用。

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