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嗅感觉神经细胞的分离与培养

魏永祥  韩德民  蔡贞  杨凌  刘小超  羡慕  张晓斌  
【摘要】:目的:建立成体哺乳动物嗅感觉神经细胞体外培养的方法。方法:取成年家兔的嗅区黏膜,用胰酶和胶原酶消化法进行嗅感觉神经细胞的急性分离与原代培养,并应用抗神经微丝蛋白(NFP)抗体、抗嗅觉标记蛋白(OMP)抗体进行免疫细胞化学染色,同时采用甲苯胺蓝神经特异性染色和扫描电镜对其进行鉴定。结果:从嗅黏膜急性分离以及原代培养得到的嗅感觉神经元,光镜、电镜下为典型的双极神经元,OMP、NFP阳性,神经元特异性染色阳性。急性分离的嗅感觉神经元可在体外存活数小时,其细胞形态、生存数量和存活时间均能满足体外实验的基本要求。结论:本实验在家兔建立了较稳定、可靠的嗅感觉神经细胞分离和原代培养方法。为深入开展嗅感觉神经细胞的离体研究,提供了较为理想的材料来源和技术保障。

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