微悬臂梁传感研究抗体修饰方法对瘦肉精检测的影响

【摘要】：微悬臂梁生化传感技术是在原子力显微镜和微机电系统出现后迅速发展起来的一种新的传感方法。当微悬臂梁的单侧表面有分子吸附或生化反应发生时,其表面应力的改变导致微悬臂梁产生弯曲变形。借助于光学读出方法,可以读出该变形并将其转化为相应的电信号输出。本文利用微悬臂梁传感技术研究了在两种抗体修饰方法下,瘦肉精抗原抗体的特异性结合。(1)利用盐酸硫醇亚胺将瘦肉精抗体巯基化,再将巯基化的瘦肉精抗体通过自组装修饰到微悬臂梁的金面;(2)将金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)修饰到微悬臂梁的金面,再利用其将瘦肉精抗体吸附。在加入不同浓度的瘦肉精标准样品的过程中,分别监测两种修饰方法下微悬臂梁的实时弯曲信号。巯基化前后瘦肉精抗体的活性和微悬臂梁上抗原抗体的结合得到酶联免疫吸附(ELISA)实验的验证。实验结果表明:两种修饰方法下,系统都能够检测至少1ng/ml浓度的瘦肉精标准样品,好于抗体的半抑制浓度IC_(50),抗体的活性直接影响检测的效果。抗原抗体的结合具有很强的选择性,在对照实验中加入不含瘦肉精的1μg/ml氯霉素溶液没有响应。瘦肉精抗原抗体的结合导致微悬臂梁产生压应力,而且微悬臂梁表面应力的改变与样品浓度的对数成线性关系。