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《中华中医药学会糖尿病分会全国中医药糖尿病大会(第十九次)资料汇编》2018年
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黄芪甲苷对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞炎性损伤的保护作用机制研究

尤良震  方朝晖  
【摘要】:目的:通过建立体外高糖诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤模型,研究黄芪甲苷(AS-IV)对高糖诱导HUVECs损伤的保护作用及其分子机制,为糖尿病及其并发症的防治提供实验依据与新思路。方法:体外培养HUVECs细胞株,按培养基终末葡萄糖浓度与作用时间不同,建立体外高糖损伤人脐静脉内皮细胞模型。实验分正常对照组、高糖模型组、JNK抑制剂组、黄芪甲苷组、JNK抑制剂+黄芪甲苷组,相关处理后继续培养24h,荧光染色观察细胞凋亡形态;流式细胞术检测细胞凋亡率;ELISA法检测HUVECs上清液中TNF-α和IL-1β的含量;荧光定量PCR检测HUVECs中TNF-α和IL-1βmRNA表达量;Western blot法检测HUVECs中JNK、pJNK、ASK1、p-ASK1、Cyt-c、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达水平。结果:与正常对照组比较,高糖模型组细胞凋亡增多,细胞上清液中TNF-α和IL-1β的含量显著升高(P0.01),HUVECs中TNF-α和IL-1β的mRNA表达量升高,p-JNK、p-ASK1、Bax、Cyt-c、Caspase-9、Caspase-3表达显著增多(P0.01),Bcl-2表达显著降低(P0.01),p-JNK/JNK、p-ASKl/ASK1、Bax/Bcl-2值增大(P0.01)。与高糖模型组比较,黄芪甲苷组细胞凋亡减少,上清中TNF-α和IL-1β的含量与模型组比均显著下降(P0.01),HUVECs中TNF-α和IL-1β的mRNA上调倍数减小(P0.01),p-JNK、p-ASK1、Bax、Cyt-c、Caspase-9、Caspase-3表达降低(P0.05或P0.01),p-JNK/JNK、p-ASK1/ASK1、Bax/Bcl-2值减小(P0.05或P0.01);抑制剂组p-JNK、Bax、Cyt-c、Caspase-9、Caspase-3表达降低(P0.05或P0.01),p-JNK/JNK、Bax/Bcl-2值减小;黄芪甲苷+抑制剂组与黄芪甲苷组结果一致;与抑制剂组比较,黄芪甲苷组p-JNK表达高于抑制剂组(P0.01)。结论:黄芪甲苷对高糖诱导的HUVECs具有保护作用,其机制可能是通过抑制JNK信号通路过度激活,减少细胞炎性反应,降低细胞凋亡有关。
【作者单位】:安徽中医药大学第一附属医院
【分类号】:R285.5

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