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FTZ保护胰岛β细胞损伤的作用及机制探究

陈健媚  张晶晶  贝伟剑  郭姣  
【摘要】:目的探究FTZ对高糖高脂饮食诱发糖尿病大鼠胰腺损伤的保护作用及机制。方法 1、SD雄性大鼠用高糖高脂饲养加腹腔注射37 mg/kg的链脲佐菌素,制备空腹血糖值≥11.1 mM的高血糖模型大鼠;随机分模型组、罗格列酮组(0.63mg/kg/d)、FTZ高、低剂量组(3、6g生药/kg/d);给药8周,检测大鼠空腹血糖和口服葡萄糖耐量和血脂谱水平。实验结束取胰腺固定,石蜡切片,HE染色观察胰岛组织的形态。2.制备大鼠FTZ含药血清,培养INS-1胰岛β细胞、分组:对照组(11 M glucose组),高糖(25 M)模型组,高糖模型+给药(Edaravone,低、中、高剂量FTZ含药血清)各组,给药培养48 h,收集细胞,Annexin V-FITC试剂盒检测INS-1胰岛β细胞凋亡,DCFH-DA荧光探针试剂盒检测细胞内的ROS水平;试剂盒检测细胞内SOD、MDA水平;凋亡蛋白酶Caspase 9和Caspase 3活性和细胞上清液中胰岛素释放浓度;提取细胞总蛋白、Western Blot检测细胞内Mn-SOD、CAT、PDX-1和Glut2、抗凋亡蛋白Bcl-2/Bcl-xl及促凋亡蛋白Bax的蛋白表达水平。结果:1 FTZ能显著降低高糖大鼠空腹血糖达26.8%,且可显著改善其葡萄糖耐受量、TC、TG和LDL-C,升高Insulin和HDL-C的水平,改善胰腺中胰岛β细胞的萎缩损伤。罗格列酮也有类似结果。2.FTZ含药血清能降低高糖诱发的ISN-胰岛β细胞内ROS、MDA浓度显著上升;并提高细胞抗化化蛋白Mn-SOD、CAT、抗凋亡蛋白Bcl-2/Bcl-xl的蛋白表达量;降低促凋亡蛋白Bax的蛋白表达量和细胞凋亡蛋白酶caspase 9和caspase 3的活性;并显著降低细胞凋亡率。还可显著提高细胞的PDX-1和Glut 2蛋白表达量,提高细胞中葡萄糖刺激的胰岛素释放浓度。结论 FTZ可降低高糖高脂代谢病大鼠体内的血糖,调节血脂,减轻高糖诱发的胰岛β细胞氧化应激损伤,其作用机制与提高细胞抗氧化能力,调节氧化应激损伤的瀑布级联反应相关蛋白,以及改善胰岛素转运蛋白表达有关。

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