收藏本站
《中国奶业协会年会论文集2009(上册)》2009年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

融合蛋白Rv3872/CFP-10/ESAT-6的制备及在牛结核诊断中的初步应用

刘冬光  廖娟红  于清龙  陈颖钰  陈焕春  郭爱珍  
【摘要】:本研究通过融合表达Rv3872、CFP-10和ESAT-6.以改良牛结核病特异性鉴别诊断抗原CFP-10-ESAT-6,提高牛结核抗体鉴别诊断法的灵敏度。利用PCR方法.克隆牛分枝杆菌RD1区上述三个基因,通过酶切连接方法,将三个基因串联在pET-28a载体上,基因之间用Linker序列连接。融合基因在大肠杆菌内经IPTG 0.4mmol L-1诱导3h,目的蛋白经SDS-PAGE证实表达在上清中.Western-blot分析证实表达蛋白具有免疫原性。以所表达的融合蛋白作为包被抗原建立间接ELISA.检测了44份牛分枝杆菌感染背景清楚的临床奶牛血清。26份阳性血清中,Rv3872-CFP-10-ESAT-6融合蛋白ELISA检出阳性样本18份.检测灵敏度为69%,而CFP-10-ESAT-6融合蛋白ELISA只检出阳性样本4份。18份阴性血清中,两种ELISA均检出17份阴性血清,特异性都为94(17/18)。因此,Rv3872-CFP-10-ESAT-6融合蛋白在对牛结核抗体检测特异性没有降低的情况下.敏感性获得了显著提高.这对牛结核病的早期鉴别诊断方法的建立具有重要意义。

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 张书环;杨俊兴;晁彦杰;颜邦芬;吴波;曹莎;陈颖钰;谭亚娣;陈焕春;郭爱珍;;牛结核病抗体胶体金快速检测技术的建立和应用[J];动物医学进展;2007年07期
2 吴波;张书环;邓铨涛;项杰;陈军;刘朝;陈鑫;宋念华;陶淑珍;黄继根;韩永佩;赵波;林祥梅;陈焕春;郭爱珍;;四种牛分枝杆菌特异性蛋白融合表达及在牛结核病诊断中的临床应用[J];中国奶牛;2007年10期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 陈兰英,赵桢,王晓涛,屈二军,陈建南;HSP70基因在人胃癌、食道癌及宫颈癌中高表达和癌变关系的研究[J];癌变.畸变.突变;2005年04期
2 程烽;盛燕;施静艺;陈漪;徐潮;刘智;梁军;潘春明;朱忠勇;宋怀东;;重叠延伸PCR法构建UGRP1基因启动子的点突变表达载体[J];癌变.畸变.突变;2007年01期
3 温居一;张积仁;李鹏;张军;王斌;;NADH对二乙基亚硝胺所致L02人肝细胞株p53基因突变和c-erbB2基因表达的影响[J];癌变.畸变.突变;2009年05期
4 金艺凤;李铁臣;王莹;刘东华;孙珍贵;;ERCC1和XPD单核苷酸多态性与非小细胞肺癌铂类化疗敏感性的关系[J];癌变·畸变·突变;2010年05期
5 王继英;武英;郭建凤;呼红梅;张印;;莱芜黑猪保种群促卵泡素β亚基和雌激素受体基因、基因型变化情况[J];山东农业科学;2007年01期
6 陈静;胡晓辉;苗华荣;张建成;禹山林;;花生SRAP-PCR技术体系的优化[J];山东农业科学;2008年05期
7 陈长宝;朱树华;周杰;;改良CTAB法提取成熟肥城桃果实的总RNA[J];山东农业科学;2009年05期
8 葛宏华,肖亚中,姚建平;人心室肌球蛋白轻链1基因的克隆及其体外的表达与纯化[J];安徽大学学报(自然科学版);2004年06期
9 侯新东;盛桂莲;张桦;腊萍;;质粒DNA提取方法的探讨[J];安徽农学通报;2006年13期
10 朱美霞,孟艳玲,陈良兵;大豆与棉花抗性基因类似物的同源性比较及其进化分析[J];安徽农业科学;2005年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 朱林;江昌俊;叶爱华;李叶云;余梅;邓威威;;茶树ATP硫化酶和硒半胱氨酸甲基转移酶基因植物表达载体的构建[A];现代农业理论与实践——安徽现代农业博士科技论坛论文集[C];2007年
2 庄金秋;梅建国;沈志强;;胶体金免疫层析技术在兽医临床诊断中的应用进展[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
3 陈颖钰;邓铨涛;郭爱珍;晁彦杰;匡有吉;于清龙;陈焕春;;基于结核菌素与ESAT-6/CFP-10的牛IFN-γ检测法在牛结核病诊断中的比较研究[A];第三届中国奶牛发展大会论文集[C];2008年
4 徐波;张莉;李启云;王景会;姜媛媛;杨贞耐;;牛凝乳酶成熟肽基因在大肠杆菌中的表达[A];中国奶业协会年会论文集2008(下册)[C];2008年
5 张海龙;田兆丰;董志;张晏如;张飞云;;多花黑麦草斑驳病毒外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达[A];2010植物免疫机制研究及其调控研讨会论文集[C];2010年
6 闫云君;蔡勇;杨江科;;基于易错POR技术的短小芽胞杆菌(Bacillus pumilus)脂肪酶YZO2的定向进化[A];节能环保 和谐发展——2007中国科协年会论文集(一)[C];2007年
7 李玫;廖宝文;;红树林湿地烷烃降解菌的分离筛选[A];第十三届中国科协年会第16分会场-沿海生态建设与城乡人居环境学术研讨会论文集[C];2011年
8 郭奕斌;陈路明;孟亚仙;王晶晶;杜传书;潘敬新;;一个广东四川家庭的IDS基因新突变[A];第六届全国优生科学大会论文汇编[C];2006年
9 于占东;赵双宜;何启伟;王翠花;牟晋华;刘春香;;抗芜菁花叶病毒转基因大白菜的研究[A];中国园艺学会第十届会员代表大会暨学术讨论会论文集[C];2005年
10 龚束芳;杨涛;车代弟;;偃麦草根茎非质体蛋白质修饰冰晶能力的观察[A];2007年中国园艺学会观赏园艺专业委员会年会论文集[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 徐荣燕;嗜热真菌糖苷酶的基因克隆、表达与分子改造[D];山东农业大学;2010年
2 殷慧群;猪诱导性多潜能干细胞的建立[D];安徽农业大学;2010年
3 杨瑞梅;单链抗体介导狂犬病毒shRNA靶向制剂的研究[D];甘肃农业大学;2010年
4 宋翠平;H5N1禽流感和鹅Ⅰ型副粘病毒分离株的生物学特性及感染性的研究[D];中国海洋大学;2010年
5 郭新军;拟黑多刺蚁肌细胞增强因子2与肌钙蛋白Ⅰ亚基基因的克隆及其在发育中的表达研究[D];陕西师范大学;2010年
6 生书晶;何首乌芪合酶基因(FmSTS)的克隆、鉴定及转化拟南芥研究[D];华南理工大学;2010年
7 梁东;苹果山梨醇代谢相关基因的分子特性研究[D];西北农林科技大学;2010年
8 朱彦涛;甘蓝型油菜Polima CMS和陕2A CMS的形态和生化特征及其胞质遗传物质的比较研究[D];西北农林科技大学;2010年
9 温武军;鲤抗菌肽基因的克隆及其功能研究[D];山东师范大学;2011年
10 王秀娟;嗜热真菌纤维二糖水解酶(CBHⅠ、CBHⅡ)和内切葡聚糖酶(EGⅠ)的分子改造[D];山东农业大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 高红梅;ETEC对断奶腹泻仔猪胃肠道紧密连接蛋白ZO-1的影响[D];华中农业大学;2010年
2 王树云;斑点叉尾鮰病毒ORF6和ORF10基因的原核表达及其功能的初步研究[D];华中农业大学;2010年
3 汪艳杰;水稻polycomb基因家族甲基化状态初步检测[D];华中农业大学;2010年
4 王伟;恶臭假单胞菌表面展示细菌漆酶及对染料的脱色性能[D];华中农业大学;2010年
5 黄辉;哈维弧菌表面抗原的克隆和真核表达[D];华中农业大学;2010年
6 段龙川;产毒素多杀性巴氏杆菌重组沙门氏菌基因工程疫苗的研究[D];华中农业大学;2010年
7 龚瑞;粘附素ClfA和Cna对金黄色葡萄球菌乳腺炎的免疫保护研究[D];华中农业大学;2010年
8 刘源;猪胸膜肺炎放线杆菌双组分调控系统ΔnarQ/narP突变株构建及功能研究[D];华中农业大学;2010年
9 李善文;蟾蜍灵对大鼠肾小球系膜细胞增殖及凋亡的影响[D];南京医科大学;2009年
10 辛宁;PDX-1真核表达载体构建及其在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达[D];郑州大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前6条
1 王文勇,李玉松,赵一岭;一种快速、稳定制备胶体金的新方法[J];细胞与分子免疫学杂志;1997年S1期
2 刘思国,于辉,宫强,王牟平,王春来,彭永刚;牛结核病研究进展[J];畜牧兽医科技信息;2003年10期
3 郭设平;刘思国;张秀华;王春来;宫强;郭洋;邵美丽;;牛分枝杆菌抗原MPB70、MPB83和ESAT-6的融合表达及重组蛋白的初步应用[J];畜牧兽医学报;2006年07期
4 王忠仁;牛结核病与人结核病的相互关系[J];中国防痨杂志;2005年02期
5 杨卫冲,焦新安;牛结核病诊断技术的研究进展[J];中国人兽共患病杂志;2004年12期
6 霍峰,惠观涛;应用琼脂扩散法检测小鹅瘟抗原抗体[J];中国兽医杂志;2000年02期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王佳;孙铭泽;赵宇;刘宇鹏;刘慧玉;张英;李莉;刘松财;;鸡干扰素α1及胸腺肽α1融合蛋白原核表达系统的建立[J];中国兽医学报;2008年10期
2 李书光;管宇;肖跃强;王金良;沈志强;;大肠杆菌K_(99)-ST_1双价基因工程菌株的构建及其免疫原性[J];中国兽医学报;2009年05期
3 牛金鹏;王惠川;吴国娟;;鸡干扰素α受体Ⅱ胞外域的克隆及GST融合蛋白原核表达[J];北京农学院学报;2010年04期
4 黄运茂,施振旦,刘颖,毕英佐,刘丽;血管活性肠肽与乙肝病毒核心抗原的融合表达、鉴定及其纯化[J];农业生物技术学报;2003年05期
5 张桂芝;陈亚波;徐程;张朝政;方维焕;;新城疫病毒F蛋白结构域基因原核表达与抗原表位分析[J];浙江大学学报(农业与生命科学版);2006年01期
6 郭海勇;崔京春;钱爱东;;葡萄球菌GST-mTSST-1融合蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立[J];中国兽医科学;2007年12期
7 于志丹;王君伟;孙进华;藏玉婷;张雅为;;鹅细小病毒VP3基因和鹅副黏病毒F基因在重组禽痘病毒中联合表达[J];中国兽医杂志;2008年07期
8 韩宗玺;马得莹;刘胜旺;李一经;;重组鸡抗菌肽Gallinacin-9的原核表达及其抗菌活性的鉴定[J];畜牧兽医学报;2008年10期
9 刘庆伟;邱亚峰;王晓杜;郭林;刘超;沈阳;李向东;单虎;马志永;;伪狂犬病病毒Bartha株gC膜外区部分基因的原核表达及纯化[J];动物医学进展;2009年02期
10 束刚;冯嘉颖;余凯凡;徐平稳;朱晓彤;高萍;王松波;习欠云;王修启;张永亮;江青艳;;FAT/CD36融合蛋白的表达及其对鸡腹脂沉积的特异性调控[J];中国农业科学;2009年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陈金顶;廖明;辛朝安;;鹅Ⅰ型禽副粘病毒株融合蛋白(F)基因的克隆及序列分析[A];中国畜牧兽医学会禽病学会分会第十次学术研讨会论文集[C];2000年
2 刘冬光;廖娟红;于清龙;陈颖钰;陈焕春;郭爱珍;;融合蛋白Rv3872/CFP-10/ESAT-6的制备及在牛结核诊断中的初步应用[A];中国奶业协会年会论文集2009(上册)[C];2009年
3 廖文艳;马得莹;;重组鸡β-防御素10蛋白的原核表达及其理化特性的分析[A];中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十次学术研讨会论文集[C];2008年
4 关振宏;丛彦龙;段铭;张茂林;严景华;;GST-p58~(IPK)融合蛋白的表达、纯化及活性鉴定[A];第二届全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2008年
5 杜爱芳;王素华;索勋;;鸡柔嫩艾美耳球虫5401基因的表达与Western-blot检测[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第五次代表大会暨第八次学术研讨会论文集[C];2004年
6 杨润军;李俊雅;高雪;陈金宝;赵志辉;许尚忠;;牛Fas基因真核表达载体的构建及在牛卵泡颗粒细胞中的表达[A];中国动物遗传育种研究进展——第十五次全国动物遗传育种学术讨论会论文集[C];2009年
7 康波;郭丽;陈萍;计红;杨焕民;;白鹅催乳素基因的克隆及表达[A];全国动物生理生化第十次学术交流会论文摘要汇编[C];2008年
8 马得莹;单安山;;重组鸡β防御素5的原核表达及其抗菌活性的鉴定[A];中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十次学术研讨会论文集[C];2008年
9 余劲术;刘晶;汪明;刘群;;新孢子虫NcSRS2基因和NcSAG1基因的融合表达、纯化与免疫原性分析[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第九次学术研讨会论文摘要集[C];2006年
10 廖文艳;马得莹;;重组鸭β-防御素9基因的克隆、组织分布及其原核表达[A];中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十次学术研讨会论文集[C];2008年
中国重要报纸全文数据库 前8条
1 李雯;新技术可快速检测牛结核[N];中国知识产权报;2009年
2 记者 张晔 通讯员 顾亮亮;我国自主研制出快检牛结核试剂盒[N];科技日报;2009年
3 阎恩成 刘忠琛;慧眼巧识奶牛病[N];中国畜牧报;2002年
4 记者 白毅;北平顶猴TRIM5基因和HIV—1感染相关性研究获进展[N];中国医药报;2009年
5 本报记者 伍平;平顶猴易感HIV分子机制研究获重大突破[N];云南科技报;2009年
6 杨红先;奶牛分月管理法[N];山西科技报;2002年
7 严斯刚;奶牛结核病[N];中国畜牧报;2002年
8 河北农业大学动物科技学院副教授 宋勤叶;得以控制的疫病为何卷土重来[N];河南科技报;2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 柏亚铎;犬瘟热病毒、犬冠状病毒入侵宿主细胞机制研究[D];中国农业大学;2005年
2 殷慧群;猪诱导性多潜能干细胞的建立[D];安徽农业大学;2010年
3 张晓东;新城疫病毒La Sota克隆株的筛选与全长cDNA克隆的构建[D];中国农业科学院;2009年
4 陈萍;出血性大肠杆菌O157 eae基因的克隆、表达及免疫学特性研究[D];吉林大学;2005年
5 王劼;猪源肠毒素大肠杆菌K88ac和F18ac菌毛蛋白基因的表达及其在卵黄抗体生产中的应用[D];华中农业大学;2007年
6 王永;新城疫病毒F和HN囊膜蛋白对其致病力影响的研究[D];内蒙古农业大学;2007年
7 欧瑜;猪链球菌2型毒力相关蛋白的检测及其基因片段的克隆与表达[D];南京农业大学;2001年
8 张晨飞;MDV-1 CVI988疫苗株VP22及UL13蛋白功能初步研究[D];扬州大学;2009年
9 John M.Dikki;减毒沙门氏菌为载体的原核与真核表达和鸡新城疫病毒表面糖蛋白基因免疫研究[D];浙江大学;2005年
10 潘志明;重组减毒细菌运送CD8~+T细胞表位的机理及携带新城疫病毒DNA 疫苗鼠伤寒沙门氏菌的免疫生物学特性研究[D];扬州大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 周舟;结核分枝杆菌CFP10-ESAT6-CFP21融合蛋白的克隆表达及其诊断应用[D];苏州大学;2010年
2 逄媛;猪源产肠毒素性大肠杆菌K88、K99,987P、F41双基因串联表达的研究[D];山东农业大学;2008年
3 徐忠林;共表达NDV F 基因与H9亚型AIV HA基因的重组鸡痘病毒及其免疫效力[D];扬州大学;2005年
4 欧阳萍;人溶菌酶—抗菌肽融合表达及其对小鼠乳房炎的疗效观察[D];吉林大学;2009年
5 王喜军;尼帕病毒性脑炎诊断与免疫防制技术的研究[D];内蒙古农业大学;2005年
6 陈亚波;新城疫病毒HN蛋白与F蛋白结构域共表达对细胞融合的影响[D];浙江大学;2006年
7 张敬梅;一株分泌猪IFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞的制备与鉴定[D];安徽农业大学;2009年
8 田进海;重组Cre融合蛋白的表达及蛋白转导效率研究[D];西北农林科技大学;2012年
9 王学强;鸡IL-18与新城疫HN基因融合蛋白酵母表达条件的优化及生物活性研究[D];河南科技大学;2010年
10 张广雷;布氏杆菌L7/L12和OMP31基因克隆及其融合蛋白免疫原性研究[D];江苏科技大学;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026