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《2018全国中西医结合皮肤性病学术年会论文汇编》2018年
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钙蛋白酶介导NF-κB/STAT3通路调控巨噬细胞极化的分子机制

胡琼依  王强  
【摘要】:目的:探讨钙蛋白酶(calpain)调控巨噬细胞极化的分子机制。方法:以巨噬细胞RAW264.7为模型,通过脂质体lipo2000瞬时转染技术干扰巨噬细胞内calpain1/2的表达,实时荧光定量PCR(qRTPCR)分析巨噬细胞极化类型,Western blot检测相关信号通路的蛋白表达,Transwell法检测巨噬细胞迁移功能。结果:Calpain1在M1型细胞内表达水平较M2型低(P0.05),而calpain2在M1型细胞内表达水平与M2型相比明显升高(P0.05);脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激巨噬细胞calpain1-siRNA组M1型细胞标志物(白介素-23(interleukin-23,IL-23),肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α),和诱导型-氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS))和M2型细胞标志物(白介素-10(interleukin-10,IL-10),转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β),合成精氨酸酶-1(arginase-1,Arg-1))mRNA水平降低;calpain2-siRNA组M1型细胞标志物mRNA水平明显降低(P0.05),而M2型细胞标志物mRNA水平升高(P0.05);在calpain2-siRNA干预组,LPS刺激巨噬细胞的细胞总的磷酸化-IKK(phosphorylation inhibitor of nuclear factor kappa-B kinase,P-IKK)蛋白表达水平降低;IL-4刺激巨噬细胞的细胞浆的信号转录和转导因子3(signal transducers and activators of transcription,STAT3)蛋白表达水平降低,而细胞总的磷酸化-p65(phosphorylation-p65,p-p65)水平无差异(P0.05);calpain1-siRNA和calpain2-siRNA干预后,巨噬细胞的迁移能力都减弱(P0.05)。结论:Calpain2可能通过NF-κB和STAT3信号通路促使巨噬细胞向M1极化,并调控巨噬细胞的迁移。

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