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《微生物与人类健康科技论坛论文汇编》2009年
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刺桐胰蛋白酶抑制剂突变体在大肠杆菌中的表达及在TPA纯化中的应用

朱美财  占志  王雅静  蔡庆  
【摘要】:目的构建刺桐胰蛋白酶抑制剂突变体(rserETI)原核表达载体,制备表达产物用于TPA的纯化。方法设计合成了rserETI编码序列DNA片段,以PCR法扩增出全长编码区序列,经酶切后克隆到PET9a表达载体,转入大肠杆菌JM109DE3以IPTG诱导表达,表达产物经复性、QFF层析纯化后,与溴化氰活化的Sepharose耦联合成亲和层析柱,纯化重组TPA。结果 rserETI在表达大肠杆菌中占菌体蛋白的30%,复性率为80%,QFF层析纯化达电泳纯,耦联合成的rserETI-Sepharose亲和层析柱能特异性地纯化重组TPA。结论成功构建了rserETI原核表达载体,并在大肠杆菌高效表达,制备的表达产物可用于TPA的纯化。
【作者单位】:空军总医院临床检验中心
【分类号】:Q943.2

【参考文献】
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