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《浙江省动物学会第十三次会员代表大会暨学术研讨会论文摘要集》2018年
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镉诱导金属硫蛋白在文蛤生精细胞凋亡中的作用

王都  叶珊珊  周佳仪  蔡佳佳  应雪萍  
【摘要】:用不同浓度Cd~(2+)溶液(0、1.5、3、6、12 mg/L)对文蛤(Meretrix meretrix)进行染毒5天,利用生物化学及分子生物学手段研究Cd~(2+)对文蛤生精细胞氧化损伤标志物含量、相关酶活性及金属硫蛋白表达量(MTmRNA)的影响;采用透射电子显微镜观察镉对生精细胞结构的影响,用DNA Ladder和AO/EB双荧光染色法检测生精细胞氧化损伤和凋亡程度。结果显示,随着Cd~(2+)浓度的升高,文蛤生精细胞凋亡程度加剧,出现较明显的梯状断裂条带,细胞形态结构发生变化以及膜性结构损伤逐渐严重。MAO活性随着Cd~(2+)浓度的增加逐渐增加,而CAT和CCO活性却逐渐降低,MDH活性随Cd~(2+)浓度的增加呈先升后降的趋势,而SOD活性无明显差异。H_2O_2和MDA含量及Caspase-3、8、9酶活随Cd~(2+)染毒浓度增大而增加,但NO含量出现先增后降的趋势。文蛤生精细胞中MTmRNA表达量随染毒浓度的升高而增加,12mg/L浓度组除与6mg/L浓度组无显著差异外,与对照组及其它浓度组间存在显著差异。且MT表达量与Caspase-3、9,MAO等指标呈显著正相关,与NO呈显著负相关;MDA含量与MT表达量呈极显著的正相关。这可能是因为过量的镉会诱导Cyt C从线粒体中释放进入细胞质,由此激活Caspase-9活性,进而激活下游效应蛋白Caspase-3,从而启动Caspase介导的凋亡级联反应,最终诱使细胞凋亡。故镉污染可导致文蛤生精细胞产生过量的ROS,MT能拮抗ROS,阻止DNA损伤,阻止CytC从线粒体释放到胞质中,从而阻止Caspase 9、Caspase 3的形成,抑制细胞凋亡。
【作者单位】:温州大学生命与环境科学学院
【分类号】:S917.4;X503.225

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