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《2011年浙江省医学会医学病毒学分会、医学微生物与免疫学分会学术年会论文汇编》2011年
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快速荧光定量RT-PCR定量检测对虾Taura综合症病毒(TSV)的方法建立与应用

王忠发  顾松叶  施慧  沈飚  
【摘要】:目的建立桃拉综合症病毒快速荧光定量RT-PCR用于提高我市对虾出口检验检疫工作效率和疫病防控。方法选取TSV基凶组的保守序列,利用Primer Express 2.0软件设计引物和探针,扩增产物长度为73bp。构建TSV目的扩增片段的质粒为标准品,对TSV的核酸提取、PT-PCR进行优化。结果 TSV核酸提取20分钟、RT-PCR34分钟,检测灵敏度为0.03fg/μl,组内的实验变异系数为0.25%~1.17%、组间实验变异系数为1.51%~2.60%,与10种病原微生物无非特异反应,定量标准曲线相关系数=-1。结论本方法用于TSV核酸定量检测速度极快,灵敏度与特异度高、重复性好、定量准确,各项指标均优于标准方法。

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