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《2011年浙江省血液病学术年会暨浙江省医学会血液病学分会成立50周年庆典论文汇编》2011年
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硼替佐米对THP-1源性巨噬细胞抗原提呈能力的影响

陈均法  郑智茵  孔英  郭艳荣  沈建平  叶宝东  林筱洁  高瑞兰  周郁鸿  
【摘要】:目的探讨低剂量蛋白酶体抑制剂硼替佐米对巨噬细胞抗原提呈功能的影响。方法以佛波脂(TPA)诱导THP-1细胞为巨噬细胞为观察模型,加入加γ干扰素(IFN-γ)及脂多糖(LPS)使之活化,分别用不同浓度(0.0625、0.125、0.25、0.5、1、2、4、6 ng/m1)的硼替佐米处理活化的巨噬细胞,在三个时间段后(24小时、48小时、72小时),采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)分别检测经硼替佐米处理后巨噬细胞增生情况,分别选择硼替佐米对THP-1细胞来源的巨噬细胞活性影响最小的剂量和时间作为实验条件,观察硼替佐米对巨噬细胞表面分子CD80、CD86、HLA-DR的表达,IL-12的分泌以及刺激淋巴细胞增殖的影响。结果 1.0.0625、0.125、0.25、0.5、1、2、4、6 ng/ml硼替佐米对经TPA诱导的THP-1细胞的抑制率分别为:①24小时:-5.05%、0.01%、-3.4%、0.01%、5.26%、2.91%、5.26%、10.37%;②48小时:-6.84%、3.52%、2.12%、3.99%、4..51%、3.78%、32.06%、56.16%;③72小时:-1.83%、-0.01%、0、0、1.94%、13.97%、78.92%、92.46%。2ng/ml以后硼替佐米对经PTA诱导的THP-1细胞的抑制率明显增加。为此我们选择对经PTA诱导的THP-1细胞增生无抑制作用的药物浓度为0.0625、0.125、0.25ng/ml,作用时间为24小时来观察巨噬细胞表面分子CD80、CD86、HLA-DR的表达,IL-12的分泌以及刺激淋巴细胞增殖的情况。2.0.0625、0.125、0.25 ng/ml硼替佐米处理24小时后的巨噬细胞表面共刺激分子CD80和CD86的阳性表达率分别为:(36.9±12.56)%、(41.5±15.95)%、(68.9±11.74)%和(68.5±3.25)%、(78.9±2.54)%、(89.5±3.46)%,随着硼替佐米剂量的增加共刺激分子CD80阳性表达率逐渐增加,不同浓度硼替佐米处理后的巨噬细胞表面共刺激分子CD80和CD86的阳性表达率与对照组相比明显增加(P值均0.05)。3.硼替佐米处理24小时后的巨噬细胞表面分子HLA-DR的阳性表达率分别为:(51.5±5..62)%、(53.2±5.74)%、(55.7±7.21)%,随着硼替佐米剂量的增加HLA-DR阳性表达率逐渐增加,有显著差异(P0.05)。4.0.0625、0.125、0.25 ng/ml硼替佐米处理24小时后的巨噬细胞分泌白介素12水平分别为:(66.14±5.74)pg/ml、(78.40±4.51)pg/ml、(102.28±6.54)pg/m1,并随着剂量的增加,分泌IL-12水平的能力逐渐增强,呈剂量依赖性,与对照组相比有显著差异(P0.05)。5.0.0625、0.125、0.25 ng/m1硼替佐米处理24小时后的巨噬细胞刺激淋巴细胞增殖的吸光度(OD值)分别为:0.368±0.025、0.392±0.032、0.424±0.041,随着剂量的增加,刺激淋巴细胞增殖能力逐渐增强,呈剂量依赖性,与对照组相比有显著差异(P0.05)。结论低剂量硼替佐米可上调巨噬细胞表面分子CD80/86、HLA-DR的表达,促进细胞因子IL-12的分泌及增强刺激淋巴细胞增殖的能力,提示低剂量硼替佐米可以通过增强巨噬细胞的抗原提呈功能而激发机体细胞免疫,发挥抗肿瘤和抗病毒功能,这为临床应用硼替佐米提供了新思路。
【作者单位】:浙江省中医院血液科
【分类号】:R965

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