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《第六届江浙沪儿科学术会议暨儿科学基础与临床研究进展学术班论文汇编》2009年
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血管生成素样蛋白3在人和大鼠足细胞的定位特点及与足突融合的关系探讨

高霞  徐虹  
【摘要】:目的探讨血管生成素样蛋白3在肾脏足细胞的精确定位及其表达与足突融合和蛋白尿的相关性。方法(1)第0天阿霉素7mg/kg尾静脉注射SD雄性大鼠,建立微小病变型肾病综合症大鼠模型,每周监测24小时尿蛋白定量,并分别在第0,14,28,35,49天取肾组织HE染色,普通透射电镜分析造模结果;收集微小病变型肾病患儿及正常人肾组织;正常对照组、肾病大鼠及肾病患儿的肾组织分别一部分醛固定石蜡包埋后,辣根过氧化物酶标记免疫组织化学法分析人和大鼠肾小球ANGPTL3的表达情况,并半定量分析ANGPTL3在肾小球的表达量与不同程度蛋白尿的关系;另一部分新鲜组织经PLP固定后,采用直径10nm胶体金标记针对ANGPTL3的二抗进行免疫电镜检测,电镜下观察ANGPTL3在足细胞的亚细胞分布,同时半定量分析ANGPTL3在足细胞的分布量与足突融合的相关性;(3)SPSS10.0软件统计学处理数据。结果(1)阿霉素肾病大鼠24小时尿蛋白总量在造模第28天达峰值,HE染色模型鼠的肾小球和肾小管组织结构基本无改变,透射电镜显示足细胞广泛足突融合;(2)免疫组化DAB显色提示人和大鼠肾小球均表达ANGPTL3,且主要表达在肾小球的足细胞,其表达量与蛋白尿程度呈正相关,正常状态下肾小球仅有微弱ANGPTL3表达;(3)免疫电镜检测显示,ANGPTL3在肾小球仅特异性表达于足细胞,在内皮细胞及系膜细胞均未见表达,其在足细胞主要定位于足突部的胞浆中,并向胞膜弥散分布,符合分泌型蛋白的特点。正常人和大鼠的足细胞电镜下仅能见到极少量胶体金颗粒,而在肾病患儿及不同时间点的阿霉素肾病大鼠的足细胞胶体金颗粒的量随着足突融合程度的加剧而显著增多。结论人和大鼠肾脏足细胞均能够合成ANGPTL3,其在足细胞主要定位在足突部的胞浆中,并呈弥散分布;ANGPTL3在足细胞正常状态下仅有微量表达,其表达量与蛋白尿程度及足细胞足突融合程度呈显著正相关。
【作者单位】:复旦大学附属儿科医院肾脏风湿科
【分类号】:R692

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