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《2009年浙江省血液病学学术年会论文集》2009年
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钙调素小檗胺通过上调Smad3蛋白表达诱导KU812细胞凋亡的研究

梁赟  赵小英  魏艳淋  徐荣臻  
【摘要】:目的探讨小檗胺(Berbamine,BBM)对人白血病细胞株KU812细胞的作用及其机制。方法采用MTT法测定不同浓度BBM作用后细胞增值抑制率并求得IC_(50);流式细胞术分析细胞周期及凋亡检测;RT-PCR检测药物作用前后细胞TGF-β受体(TβRs)、Smad3、c-myc、p21~(Cipl)(p21)及p27~(Kipl)(p27) mRNA的表达;Western blot检测药物作用前后总Smad3、磷酸化Smad3(p-Smad3)、Smad3下游蛋白以及凋亡相关因子的表达。结果BBM抑制KU812细胞增殖并呈剂量依赖性,48h的IC50值为5.9μg/ml;流式细胞术检测BBM作用后细胞周期阻滞于G1/M期,8μg/ml BBM作用36h后KU812细胞的的凋亡率由对照的0.68%升高至53.17%;药物作用后KU812细胞Smad3和p21 mRNA表达水平上调,TβRⅠ、TβRⅡ、c-myc和p27mRNA水平没有明显改变;进一步免疫印迹显示BBM作用后总Smad3及P-Smad3蛋白表达增高,c-myc和cyclin D1蛋白表达相应减少,p-21蛋白表达增高,同时观察到抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-XL、Bid及survivin表达减低,促凋亡蛋白BAX表达增高。结论BBM能抑制KU812白血病细胞的增值,在没有外界TGF-β刺激下活化Smad3蛋白,改变下游c-myc、cyclinD1以及p21的表达,同时影响与细胞凋亡密切相关的Bcl-2家族成员以及下调survivin蛋白水平的表达,最终细胞周期阻滞并诱导凋亡。
【作者单位】:浙江大学医学院附属第二医院血液科
【分类号】:R733.7

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