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《2007年浙江省医学病毒学、医学微生物与免疫学学术年会论文汇编》2007年
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实时荧光PCR定量检测戊型肝炎病毒的方法研究

沃恩康  陈勇  
【摘要】:目的:建立灵敏、稳定、专一性强的荧光定量 PCR 方法,用于对戊型肝炎病毒的定量检测。方法:针对国内流行的戊型肝炎病毒株序列,选择位于 ORF2的保守区域设计引物和 Taqman 探针。以克隆有目的扩增片段的重组质粒 pET28a-ORF_(23)为定量标准品,建立荧光定量 PCR 方法。结果:HEV 定量检测的灵敏度为5个拷贝每个反应,定量的线性范围达5×(10~0~10~8)9个数量级。批内重复性检测,其变异系数为1.49%;批间重复性检测,其变异系数为1.98%和2.23%。对3份阳性标本的定量结果分别为:3.8×10~2、5.4×10~2和1.1×10~3 copies/mg,3份健康标本以及1份甲型肝炎病毒标本均无扩增信号。结论:建立的荧光定量 PCR 方法具有灵敏度高、稳定性好、特异性强等特点,适用于 HEV 的定量检测。

【共引文献】
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