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HAG预激化疗对MUTZ-1细胞株增殖、凋亡和趋化性的影响

何冬花  胡洁  高良  蔡真  
【摘要】:目的研究粒细胞集落刺激因子(G-CSF)联合小剂量阿糖胞苷(A-rac)和高三尖杉酯碱(HHT)对人骨髓异常增生综合征(MDS)细胞株MUTZ-1(MDS-RAEB)细胞增殖、凋亡和趋化性的影响。方法以MUTZ-1细胞为研究对象,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定药物对细胞的生长抑制作用,并计算HHT对MUTZ-1的半数抑制率(IC50),采用流式细胞仪检测G-CSF 作用不同时间后细胞周期变化,然后将细胞分为六组:①对照②G-CSF③A-rac④HHT⑤A-rac+HHT ⑥G-CSF+A-rac+HHT(G-CSF提前6h或12h)处理,软琼脂细胞集落培养检测细胞增殖生长能力; 流式细胞仪检测细胞周期的变化和细胞凋亡率;激光共聚焦显微镜检测线粒体膜电位变化;RT-PCR 检测细胞趋化性因子受体基因(CXCR4,CysLT1)的表达情况;Westernblot法检测细胞趋化性相关蛋白CysLT1的表达。结果 G-CSF对MUTZ-1细胞生长无抑制作用,A-rac和HHT均能抑制MUTZ-1 细胞的生长,HHT作用24h的IC50值为97.28ng/ml:G-CSF作用4h后S期细胞增加,6h达到高峰, 12h减少到正常,24h达到最低,36h后恢复正常;HHT和A-rac作用后细胞阻滞在G1期;HAG(6h) 组较HA组细胞集落形成减少,凋亡率增高、线粒体膜电位下降、趋化性因子受体CXCR4mRNA表达降低而CysLT1的mRNA和蛋白表达增高。结论HAG预激(6h)化疗较HA方案能够抑制MDS 细胞株MUTZ-1细胞增殖、增加凋亡并增强细胞向骨外趋化的能力。

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