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《2006年浙江省神经病学学术年会论文汇编》2006年
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pcDNA-MuSK保护实验性自身免疫性重症肌无力乙酰胆碱受体初步观察

张旭  
【摘要】:目的探讨特异性酪氨酸激酶(MuSK)对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)动物终板乙酰胆碱受体的保护。方法①用基因工程的方法构建pcDNA-MuSK,以EcoRI和XbaI双酶切鉴定后,随机选取6 个克隆扩大培养。重组质粒大量扩增,以碱裂解法大量提取质粒。②pcDNA-MuSK转染:14只8 周龄雌性Lewis大鼠,体重168~220g,平均196.9±17.3g。分别于左大腿外侧肌注射pcDNA-MuSK 75μg/100g(预处理),对侧大腿外侧肌相应部位注射等量的Vector(质粒DNA,作为阴性对照)。注射5分钟后,以方波电刺激器BTX ECM 830(USA),电压为200v/cm肌肉厚度,频率1Hz,刺激4 次,每次20ms,交换电极后以相同的频率、强度、时间刺激。③诱导EAMG及评分:14只Lewis 大鼠随机分成A、B两组,A组腹部皮下注射mAbl53100ml/100g,B组腹部皮下注射等量的PBS, 诱导后分别观察实验动物体重和按Lennon的方法进行临床评分。④根据Lindstrom等方法提取肌膜上的AChR,放射免疫法测定其浓度,并计算出AChR损失率。
【作者单位】:温州医学院附属第一医院神经科
【分类号】:R746.1

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