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《2005年华东六省一市血液病学学术会议暨浙江省血液病学学术年会论文汇编》2005年
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抗人CD14新克隆ZCH-7-2F9单链抗体原核表达载体的构建表达及活性鉴定

宁铂涛  汤永民  曹江  沈红强  钱柏芹  张海忠  张怡  郭莉  
【摘要】:正目的:构建ZCH-7-2F9(简称2F9)单链抗体(ScFV2F9)原核表达载体,获得有较高生物活性的目的蛋白,以证实所获VL和VH基因序列的正确性,也为2F9其他类型的基因工程抗体及其免疫毒素的研究奠定基础。方法:根据、VH2F9、VL2F9、(G4S)3基因序列以及pIVEX2.3-MCS空载体多克隆位点内切酶位点NdeI和SmaJ的核酸序列设计引物,采用高保真的Taq酶,通过重叠延伸拚接法(splicing by overlap extension,SOE)扩增克隆到ScFv2F9基因,经T-A克隆、测序核实后克隆

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