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《2005年浙江省儿科学学术年会论文汇编》2005年
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脂多糖对大鼠肝星状细胞瘦素分泌的影响

陈益平  陈小芳  董培红  陈永平  
【摘要】:目的用脂多糖(1ipopolysaccharide,LPS)刺激体外分离的大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC),动态观察脂多糖对HSC瘦素分泌的变化,研究脂多糖对HSC作用后瘦素的变化和意义。方法大鼠肝星状细胞(rHSC-99 北京大学人民医院肝胆外科中心冷希圣教授惠赠)以1x105/ml浓度接种于96孔培养板每孔100 μl,24h后细胞完全贴壁展开,用含10%小牛血清的DMEM 培养液同步化细胞,进行以下实验分组:LPS Ⅰ组、LPS Ⅱ组、LPSⅢ组、LPSⅣ组、加入LPS使得各组培养液中LPS浓度分别是1.25、2.5、5、10 μ8/ml,每组设6个复孔,同时设6个复孔不加LPS, 作为对照组,培养24小时。相同的条件重复1批,培养48h时。培养终止后吸取上清液-20℃冰冻保存,ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)法检测其瘦素水平。结果不同浓度LPS刺激HSC,对照组与LPS Ⅰ组、LPS Ⅱ组、LPSⅢ组、LPSⅣ组在培养24与48h对照组与LPS Ⅰ组、LPSⅡ组、LPSⅢ组、LPS Ⅳ组上清液的平均瘦素浓度分别为:1.480±0.892、4.478±3.643、12.367±4.998.、23.125±11.255、31.008±8.406与1.673±1.458、9.93±7.572、28.295±10.831、34.265±9.915、46.522±7.328(ng/L)。LPS Ⅱ组、LPSⅢ组、LPSⅣ组的平均瘦素水平均显著高于对照组,P0.01,组间两两比较有显著差异,P0.01。除空白对照组外,在同一浓度LPS刺激HSC48h 平均瘦素水平高于24h,P0.01;LPS作用HSC在24h平均瘦素浓度与LPS的浓度等级有显著正相关r=0.89,P0.01;在48h的相关系数r=0.91,P0.01。结论星状细胞在脂多糖刺激瘦素分泌水平随脂多糖作用浓度升高而增加,效应与脂多糖浓度正相关,随作用时间延长而升高,脂多糖可能是通过HSC分泌瘦素的改变是肝纤维化过程的重要机理之一。

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