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《中华医学会第五届全国胸部肿瘤及内窥镜学术会议论文汇编》2011年
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组蛋白去乙酰化酶5对肺腺癌H1299细胞迁移的影响

洪伟俊  宁允叶  胥武剑  邵艳  李强  
【摘要】:背景肺癌是死亡率极高的恶性肿瘤,其中80%为非小细胞肺癌,复发和转移是导致患者死亡的主要因素。基因的转录调控异常是肿瘤发生发展的重要因素之一,组蛋白去乙酰化酶(HDACs)和组蛋白乙酰化酶(HATs)在肿瘤细胞基因转录调控中起重要作用。HDACs使组蛋白去乙酰化后恢复带正电荷的特性,并与带负电的DNA紧密结合,染色质呈致密卷曲的阻抑结构,从而抑制基因转录;而HATs的作用刚好相反,它通过在组蛋白的N-端赖氨酸残基上引入乙酰基,促进基因转录。两者在体内处于一个动态平衡,共同参与基因的表达调控。一旦这种平衡破坏,细胞便异常增殖、分化,最终导致肿瘤的发生发展。目前已知的HDACs共有18个亚型,根据其与酵母菌HDACs的结构同源性分为四大类型,分别与酵母还原性钾依赖蛋白3(yRPD3)、酵母组蛋白去乙酰化酶1(yHDA1)、酵母沉默信息调节蛋白2(ySIR2)同源,以及新发现的Ⅳ型。HDACs在不同肿瘤中存在差异性表达,其中大多数亚型在多种肿瘤中呈高表达状态,迄今仅发现HDAC5在多种肿瘤中低表达。人组蛋白去乙酰化酶5(mHDA1/HDAC5)基因定位于染色体17q21,广泛表达于肺脏、脑、心肌、骨骼肌、胎盘等多种组织,在细胞质和细胞核中都有分布,可在细胞核和细胞质间穿梭定位,其表达及定位异常参与了肿瘤细胞的发生与发展。日本学者1[i]的研究表明,HDAC5基因表达与非小细胞肺癌预后显著相关,HDAC5表达降低的患者其预后较差,但其在肺癌细胞迁移中的作用尚未见报道。目的检测组蛋白去乙酰化酶5(HDAC5)基因在非小细胞肺癌组织中的差异性表达,研究HDAC5基因过表达对肺腺癌NCI-H1299细胞生长、迁移等的影响。方法采用Realtime-PCR、Western blot检测28例非小细胞肺癌手术标本中HDAC5的mRNA、蛋白表达;将HDAC5wt基因转染到H1299细胞中,将细胞分为转染HDAC5wt基因的实验组(HDAC5wt),未转染任何质粒的对照组(control),转染空质粒的阴性对照组(vector)。通过MTT方法比较三组细胞的生长情况;利用划痕、Transwell方法检测HDAC5基因过表达对细胞迁移能力的影响。结果与癌旁组织对照组相比,在非小细胞肺癌中,约71.4%(20/28)患者中HDAC5表达明显降低;MTT实验结果提示在5天的生长过程中,实验组OD490值显著性低于对照组及阴性对照组值;划痕实验结果显示实验组细胞迁移距离明显减小;Transwell迁移实验结果提示实验组细胞迁移的细胞数目158.3±19.42,较对照组247±12.12及阴性对照组236±14.93均显著减低。结论 HDAC5基因在非小细胞肺癌中低表达,过表达的HDAC5基因可以抑制H1299细胞的生长、迁移。
【作者单位】:第二军医大学长海医院呼吸内科
【分类号】:R734.2

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