收藏本站
《中华医学会第七次全国检验医学学术会议资料汇编》2008年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

检测HBV多聚酶YMDD基因变异的结果浅析

雷敏  岳美华  赵明  
【摘要】:乙型肝炎病毒(HBV)是一种DNA病毒,近几年应用拉米夫定针对HBV进行抗病毒治疗,其作用对HBV抑制效果显著。但在治疗过程中随服药时间的延长,易出现HBV基因组P区中高度保守的YMDD功能区发生变异,而产生对拉米夫定的耐药作用。收集106例慢性乙肝患者标本,进行临床检测报告如下:材料与方法材料:一、1.研究对象:106例临床住院患者,源于2006年1月~2007年1月。2.试剂:乙型肝炎病毒YMDD突变性核酸扩增荧光检测试剂由深圳市匹基生物工程股份有限公司提供。3.仪器:Roche Light Cycler荧光PCR扩增仪。二、方法:以Roche Light Cycler Tm杂交双探针技术为基础的核酸扩增(PCR)荧光检测。循环条件:37℃3min;92℃1min预变性;93℃2 sec,42℃20sec,72℃20sec,40Cycles;93℃0 sec,37℃3min,70℃0sec退火;40℃0sec延伸。结果:106例慢性乙型肝炎患者YMDD变异检测结果中,YMDD65例占61.3%,其中男性47例,占44.3%,女性18例占17%;发生变异的41例,占38.7%,男性37例占34.9%,女性4例,占3.8%。YIDD25例占23.6%,男性21占19.8%。女性4例占3.8%;YVDD11例占10.4%.男性;YMDD+YVDD 4例占3.8%,男性;YMDD+ YIDD1例,占0.9%男性。讨论:1.本研究使用的是体外核酸扩增(PCR)方法结合杂交探针荧光检测技术,确定其基因型为野生型(YMDD)或突变型(YVDD\YIDD)。野生型YMDD的Tm值为50.0+ /-1.5℃:突变型YIDD的Tm值为42.5+/-1.5℃:突变型YVDD的Tm值为59.0+/-1.5℃。当同时存在两个检测峰值时为混合型,或存在一个峰值,但该峰值在两个标准温度之间亦为混合型。本试验的核酸提取方法操作简便,实验所需时间短,试验结果与临床表现及其他实验室相关指标相吻合,易于临床作为常规检测项目开展。2.多篇报道认为,YMDD变异的发生与基线高HBV病毒血症,HBeAg阳性、男性和高体重指数等有关。所以YMDD可为应用拉米夫定治疗慢性乙型肝炎过程中病毒发生变异及耐药性的产生提供分子生物学依据以及指导临床科学用药。

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王英才,邵济钧;用PAGE法检测婴幼儿腹泻粪便中轮状病毒核酸的研究[J];青岛大学医学院学报;1985年03期
2 郭葆玉,杜平,杨文国,吴宗娣;用生物反应器制备Namalva细胞干扰素的实验研究[J];现代免疫学;1987年06期
3 胡壬瑞;唐世忠;;成人轮状病毒引起的流行性腹泻129例分析(摘要)[J];广西医学;1987年01期
4 药立波,韩骅,钱微,苏成芝;应用人工合成寡聚脱氧核苷酸探针检测小鼠IL—2mRNA[J];中国免疫学杂志;1990年05期
5 蒋一得,李德富;逆转录病毒的检测方法[J];国际生物制品学杂志;1992年02期
6 俞康龙;邓琨;罗文侗;;肺炎支原体感染快速诊断技术进展与评价[J];国际呼吸杂志;1992年01期
7 俞善昌;有关支原体感染的几个问题[J];中国实用儿科杂志;1993年03期
8 李玉香,许昶,吕美德,张凯宇;103例肝病患者丙型肝炎病毒核酸检测及其临床意义[J];白求恩医科大学学报;1994年03期
9 李玉香,吕美德,许昶,江文成, 崔琳;逆转录巢式多聚酶链反应对输血后肝炎HCV核酸检测及临床意义[J];白求恩医科大学学报;1994年04期
10 ;创刊词[J];标记免疫分析与临床;1994年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 丁静娟;李豫;;贵州地区不同人群TT病毒核酸检测及部分核苷酸序列分析[A];中华医学会第七次全国感染病学术会议论文汇编[C];2001年
2 翟俊辉;朱红;陈梅玲;徐秀芝;孙振海;周煜;车凤翔;;生物气溶胶新型采样介质的研制[A];中国颗粒学会2002年年会暨海峡两岸颗粒技术研讨会会议论文集[C];2002年
3 蒋文玲;罗宪玲;邝素娟;汪玎妍;;测定老年心脏病CVB特异性抗体和核酸的意义[A];第三届全国老年医学进展学术会议论文集[C];2003年
4 张丽;高恩明;向金忠;常卫红;白玉;罗建辉;张克坚;;新型冠状病毒核酸扩增(PCR)荧光检测试剂盒说明书内容介绍[A];第6次全国微生物学与免疫学大会论文摘要汇编[C];2004年
5 黄呈辉;欧阳玲;黄建国;黎淦平;陈汝光;;应用核酸扩增检测(NAT)技术对血液进行HBV、HCV和HIV-1筛查[A];第6次全国微生物学与免疫学大会论文摘要汇编[C];2004年
6 陈小芳;楼永良;董琳;吕建新;;RT-PCR-ELSH检测RSV及其亚型感染的应用研究[A];第6次全国微生物学与免疫学大会论文摘要汇编[C];2004年
7 叶贤林;王良华;尚桂芳;杨立新;周一炎;;全自动核酸提取仪在血液核酸检测中的应用研究[A];中国输血协会第三届输血大会论文专辑[C];2004年
8 蒋文玲;;老年心脏病患者柯萨奇病毒B特异性抗体和核酸的检测[A];第四届全国老年医学进展学术会议论文集[C];2004年
9 徐春华;刘铁牛;连智杰;王洁珠;蔡健明;;筛查相同血源的HCV不同检测方法对比分析[A];第十届全军检验医学学术会议论文汇编[C];2005年
10 杨桂梅;高洪;徐自忠;花群义;周晓黎;;水泡性口炎病毒和牛病毒性腹泻病毒的检测方法研究[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十三次学术讨论会和中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十二次学术讨论会论文集[C];2005年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报记者 周松林;复星实业医药领域收获大[N];中国证券报;2002年
2 东北证券金融与产业研究所 聂昕;大医药战略将显成效[N];医药导报;2002年
3 记者 夏雄伟;复星实业创医药一流品牌[N];证券时报;2002年
4 郑灵巧;艾滋病毒检测技术有新规[N];健康报;2003年
5 强荧;科学的华章[N];文汇报;2003年
6 ;广州SARS疑似病例基因序列表明存在病毒变异[N];中国中医药报;2004年
7 中国医学科学院肿瘤医院原副院长 王建璋;子宫颈癌的筛查[N];保健时报;2005年
8 张荔子;肝炎病毒核酸检测引进国际标准[N];健康报;2005年
9 刘志刚;常见性病的认识和预防[N];家庭医生报;2005年
10 卫生部临床检验中心 陶其敏;如何看待病毒性肝炎基因诊断[N];科学时报;2005年
中国博士学位论文全文数据库 前3条
1 刘全;贾第虫病毒转染载体的构建及绿色荧光蛋白在贾第虫体内的表达[D];吉林大学;2005年
2 左新兵;一维微流控微珠阵列芯片在核酸检测中的应用[D];湖南大学;2007年
3 王露楠;丙型肝炎病毒核酸国家标准物质的研究[D];华中科技大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前8条
1 赵立红;实时荧光定量PCR检测临床标本中淋病奈瑟菌[D];青岛大学;2002年
2 张麒;Pooled HIV RNA RT-PCR 方法的建立及其在预测静脉吸毒人群发病率中的初步应用[D];天津医科大学;2004年
3 郑龙;实验动物皮肤病原真菌核酸检测方法的建立[D];河北医科大学;2004年
4 余红伟;金纳米粒子在核酸检测中的应用研究[D];重庆大学;2005年
5 谢新耀;直接PCR扩增体系的建立与应用性研究[D];第三军医大学;2004年
6 李超;新型化学放大电化学方法在核酸检测与环境分析中的应用[D];清华大学;2005年
7 吉英杰;HIV感染者肝组织病理学特征及核酸检测[D];中国人民解放军军医进修学院;2006年
8 肖云贵;长链核酸扩增技术评价病毒灭活效果的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2006年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026