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大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中p15ink4b在神经元和星形胶质细胞的表达

陈华先  王伟  
【摘要】:目的:比较研究大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子(cyclin dependent kinase inhibitors,CDKI)p15ink4b在神经元和星形胶质细胞的表达。方法:选用成年健康雄性Sprague-Dawley大鼠25只,建立大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAo)再灌注模型。用MRI检验模型成功后,将动物随机分为5组:正常对照组,MCAold模型组,MCAo3d模型组,MCAo7d模型组和MCAo 15d模型组。在缺血再灌注1d、3d、7d、15d后将动物快速断头处死,迅速取脑,分离缺血侧大脑皮层组织,制备单细胞悬液。用星形胶质细胞特异性抗体标记物GFAP和神经元特异性抗体标记物Neun结合FITC标记细胞悬液中的星形胶质细胞或神经元,并与p15ink4b+PE进行免疫荧光双标,应用流式细胞双参数检测术检测各组MCAo再灌流后不同时期神经元和星形胶质细胞中的p15ink4b的表达。实验数据用SPSS 12.0软件进行单因素方差分析和配对t检验。结果:局灶性脑缺血再灌注后,缺血侧皮层区星形胶质细胞中的p15ink4b的表达在再灌注3d后表达开始下调,15d表达显著下调,与正常对照组比较有显著性差异(P0.05);缺血侧大脑皮层神经元中的 p15ink4b在再灌注15d后表达下调,与对照组比较有显著性差异(P0.05);缺血侧皮层区星形胶质细胞中的p15ink4b的表达在3d、7d、15d下调与神经元相比具有显著性差异(P0.05)。结论:局灶性脑缺血再灌注损伤后,缺血侧皮层区星形胶质细胞和神经元均有p15ink4b不同程度的表达下调,星形胶质细胞中的p15ink4b表达下调比神经元更为显著。

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