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《第九次全国神经病学学术大会论文汇编》2006年
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左旋多巴诱发异动症大鼠纹状体前强啡肽原基因与DARPP-32蛋白磷酸化的关系

管强  孙圣刚  曹学兵  徐岩  王岚  
【摘要】:目的:研究左旋多巴诱发异动症(Levodopa-induced dyskinesias,LID)大鼠纹状体内前强啡肽原(prodynorphin PDyn)基因表达与DARPP-32蛋白磷酸化状态的变化,探讨LID时直接通路过度活化的机制。方法:6-羟多巴(6-OHDA) 立体定位注射黑质致密部与中脑腹侧被盖部制作帕金森病(Parkinson disease PD)大鼠模型,然后应用左旋多巴/苄丝肼治疗28 d,注射剂量为每次10 mg/kg体重,每日两次腹腔注射(9 Am与5 Pm)。根据异常不自主运动(abnormal involuntary movement)评分分为LID组(PD大鼠应用左旋多巴后出现LID症状,总评分≥20分),左旋多巴治疗组(PD大鼠应用左旋多巴后未出现LID症状)。接受同时程、同等剂量的左旋多巴治疗正常大鼠作为对照组。采用原位杂交技术检测前强啡肽原 (prodynorphin,PDyn)mRNA水平,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)及免疫印迹技术检测LID大鼠纹状体内总DARPP- 32的mRNA与蛋白表达及其Thr-34位点磷酸化水平。结果:①LID大鼠损毁侧纹状体PDyn mRNA的表达水平(0.3562± 0.0625)较健侧(0.2187±0.0569)显著增高(P0.05),亦高于对照组(0.2085±0.0573)与左旋多巴治疗组(0.2235±0.0582)毁损侧的PDyn mRNA水平,差异有显著性意义(P0.05)。②对照组、LID组、左旋多巴治疗组毁损侧与健侧及各组毁损侧纹状体之间的总DARPP-32mRNA的表达无显著性差异(P0.05)。③LID大鼠毁损侧Thr-34位点磷酸化的DARPP-32水平 (1075.2±103.3)较对照组(198.7±49.5)及L-dopa治疗组(213.91±58.9)明显增高,差异均有显著性意义(P0.01)。结论:① LID状态下纹状体内前强啡肽原水平增加,直接通路活化。②LID大鼠纹状体内总DARPP-32的转录与翻译水平无明显改变,③DARPP-32的Thr-34位点的磷酸化水平在LID状态下明显升高,其水平变化与PDyn mRNA表达的改变相一致, 它有可能是LID时多巴胺D1受体介导的直接通路异常活化的关键因素之一

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