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《第6次全国微生物学与免疫学大会论文摘要汇编》2004年
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乙型肝炎病毒PreS反义基因真核表达载体的构建及体外抗HBV病毒的研究

魏萍  冯永堂  宫伟雁  魏兵  鞠吉雨  苗乃法  牟东珍  吴国庆  孟洁  
【摘要】:正 目的:构建乙型肝炎病毒PreS反义基因真核表达载体PcDNA3.1+-PreS,与乳糖化羧甲基壳聚糖(Lac-CMCS)偶联制成导向载体,利用肝细胞膜上特有的去唾液酸糖蛋白受体,将HBVPreS反义基因的真核表达载体定向导入HepG2.2.15细胞,探讨反义基因在靶细胞内的抗病毒作用。方法:利用特设引物,用PCR技术体外扩增HBVPreS区基因,使扩增的目的基因两端带有BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制性酶切位点。经电泳鉴定,双酶切,收目的片段,即PreS。用分子克隆的方法将其反向克隆至真核表达载体PcDNA3.1+,转化大肠杆菌DH5α,经BamH Ⅰ和Hind Ⅲ酶切鉴定,证明是否构建成功了目的载体。用Lac-CMCS共价结合物作为导向载体,将构建好的乙型肝炎病毒PreS反义基因真核表达载体

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