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《第6次全国微生物学与免疫学大会论文摘要汇编》 2004年
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siRNA抑制结核分枝杆菌侵袭相关基因mcela在体外培养的人细胞内的表达

薛利军  曹明媚  秦照玲  潘欣  戚中田  
【摘要】:正 目的mcela是决定结核分枝杆菌(MTB)侵袭性的关键基因。探讨经体外转录法产生的siRNA对mcela基因在体外培养的人细胞内表达的抑制作用,以期获得具有高效、特异抑制活性的siRNA。方法首先,提取MTB(H37Rv株)基因组DNA,采用套式PCR方法扩增出mcela全长基因,克隆至pMD18-T载体,测序证实后,再克隆至真核表达载体pEGFP-N1中egfp基因的上游,得到重组质粒pEGF-PN1-mcela。其次,参照siRNA设计的一般原则,采用体外转录的方法,得到分别针对mcela基因不同区段的两条siRNA(si312和si410)以及无关对照siRNA(siIRR),并对其进行纯化和2%琼脂糖凝胶电

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