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口蹄疫DNA疫苗与灭活疫苗联合免疫引起Th1型抗原特异性免疫抑制

康友敏  王宾  
【摘要】:传统的灭活疫苗在动物传染性疾病的防制中发挥了重要的作用,但其在制作方法和应用效果上还有不足之处。DNA疫苗从效力到成本的潜在优点已使基因疫苗成为今后疫苗制造的选择,但在大动物和人体中的免疫效力尚未达到人们的期望值。当我们将口蹄疫DNA疫苗与灭活疫苗(146S抗原)联合免疫后,发现Th1型免疫反应受到抑制。这种现象是普遍存在还是与特异性的DNA和抗原有关? 本研究采用本实验室构建的口蹄疫(FMDV)pcDNA3-VP1质粒、猪瘟(CSFV)provax-E2DNA疫苗以及口蹄疫、蓝耳病(PRRS)灭活疫苗,将成年雌性C57BL/6小鼠分为六组,在第1天和14天肌肉注射:第一组,免疫pcDNA3-VP1质粒与146S抗原;第二组,pcDNA3-VP1质粒与146S抗原分为左、右腿同时注射;第三组,免疫146S;第四组,免疫pcDNA3-VP1质粒;第五组,免疫pcDNA3-VP1质粒与PRRS抗原;第六组,免疫provax-E2质粒与146S抗原。结果表明:pcDNA3-VP1质粒与146S抗原联合免疫的小鼠T细胞增殖的刺激指数(SI)最低,pcDNA3-VP1质粒及pcDNA3-VP1质粒与PRRS抗原组SI明显高于其他组;DTH结果与T细胞增殖结果一致;细胞因子水平的检测进一步表明pcDNA3-VP1质粒与146S抗原联合免疫的小鼠IL-2与IFN-水平显著低于其他组。混合淋巴细胞培养中pcDNA3-VP1质粒与146S抗原联合免疫的C57BL/6小鼠T细胞对BALB/c小鼠APC细胞刺激的增殖能力显著降低。为进一步验证pcDNA3-VP1质粒与146S抗原联合免疫产生Th1型免疫抑制的机制,用RT-PCR的方法检测了MHC、共刺激分子和细胞因子信号通路抑制因子(SOCS)的表达,发现CD40、CD80、CD86、SOCS1和SOCS3表达水平显著下降。以上结果表明pcDNA3-VP1质粒与146S抗原联合免疫产生的Th1型免疫抑制是抗原特异性的,推测可能与共刺激分子和SOCS1和SOCS3表达下降有密切关系。关于此Th1型免疫抑制产生的机制还在进一步研究中。

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