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《新世纪预防医学面临的挑战——中华预防医学会首届学术年会论文摘要集》2002年
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转基因辣椒蛋白质检测技术研究

刘建军  邓平建  房师松  赵锦  钟杨生  廖富苹  
【摘要】:正 蛋白质检测技术是转基因食品安全性检验的方法之一。本研究以转抗菌肽BD基因辣椒为材料,因抗菌肽D的背景资料比抗菌肽B清楚,我们以抗菌肽D为目标,研究建立转基因食品中外源目的蛋白的检测技术,并建立对其忠实表达状况和安全性进行评价的模式。本研究以柞蚕蛹免疫血淋巴作为标准,对照检测转抗菌肽辣椒目的蛋白表达的忠实性,采用针对转基因食品技术特点而预先设计的技术路线进行分析检测,得到令人满意的分析结果。研究和检测步骤为:目的蛋白经粗提,达到初步纯化。再用两次CM-Sepharose-FF离子交换柱层析进行中度纯化。纯化产物通过测定抗菌活性、电泳及生物自显影、质谱进行鉴定。系统的检测结果表明,以抗菌肽目的基因构建的重组体在导入辣椒后,所表达的外源目的蛋白与对照标准蛋白的理化性质、抗菌活性、分子量一致,说明在该转基因辣椒中抗菌肽目的基因的表达是忠实的,与期望值相符。检测结果与产品供应者提供的信息基本吻合,说明该检测方法是可行的。可作为标准方法应用于其他抗菌肽转基因食品,并可将其改进应用于其他转基因食品蛋白质水平的检测。

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