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《新世纪预防医学面临的挑战——中华预防医学会首届学术年会论文摘要集》2002年
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DNA氧化损伤生物学标志物-8-羟基鸟苷的KPLC-EC分析方法及特性研究

袭著革  晁福寰  孙泳梅  
【摘要】:本文应用Fenton型产羟自由基系统如螯合剂-Fe+2-H2O2系统作为氧化源,与脱氧鸟苷和小牛胸腺DNA反应生成8-OHdG,并以之作为DNA氧化损伤生物学标志物对其特性进行研究,进而研究有毒化学物质对生物体的氧化损伤。首先对8-OHdG的分析条件进行优化,对酶水解DNA的条件,储存酸度,介质环境及其稳定性进行了探讨,并用儿茶酚捕捉羟自由基的方法独立地对羟自由基进行定量评价,从而探讨不同介质环境影响8-OHdG形成机理,并采用填加氧化剂等干预措施使DNA中8-OHdG的测定既灵敏又稳定。所建立的方法灵敏度很高,最低检出限为32fmol,相关系数可达0.9996,比光学吸收法高2-3个数量级,线性范围宽达4个数量级,可满足生物体内低水平氧化损伤定量测定的要求。并应用于环境烟草烟雾及大气颗粒物污染物对核酸的氧化损伤研究。结果提示,DNA加合物8-OHdG是氧化损伤一个很好的通用的生物学标志,用HPLC-EC法可对其进行稳定灵敏的测定,是较好的生物检测手段。应用研究结果表明,生物体在有毒化学物质低剂量长时间暴露情况下,8-OHdG在体内有累积作用。

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