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《全国烧伤创面处理、感染专题研讨会论文汇编》2004年
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含人HSP72重组腺病毒制备及其在肠上皮细胞中的表达

李晓鲁  彭毅志  袁志强  太光平  陈渝  
【摘要】:正目的构建并鉴定含人全长热休克蛋白72(HSP72)基因的重组腺病毒,为严重创伤后缺血缺氧损伤的防治提供基因治疗措施。方法用同源重组方法构建含人全长 HSP72目的基因的复制缺陷型腺病毒载体 (AdCMV-HSP72),并加以鉴定、扩增,以制取高浓度 AdCMV-HSP72转染液,体外转染肠上皮细胞株 IEC-6,检测目的基因表达。结果将构建的重组腺病毒载体 AdCMV-HSP72转染肠上皮细胞并表达48h 后,RT- PCR 检测转染组显示特异性扩增的532bpHSP72目的基因片段。对照组(转染空腺病毒载体组)扩增结果为阴性。蛋白印迹结果显示 AdCMV-HSP72转染组 HSP72的表达明显增高。结论腺病毒载体可较高效率介导 HSP72在肠上皮细胞的表达,所获 AdCMV-HSP72重组腺病毒可进一步用于基因治疗研究。

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