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《第十四届中国中西医结合基础理论学术年会会议资料》2018年
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间充质干细胞经TGF-β/Smad信号通路调控大鼠CKD纤维化研究

廖媛  文丹  刁会  王丽  陈波  樊均明  
【摘要】:目的:观察间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)对阿霉素联合腺嘌呤诱导的SD大鼠慢性肾病CKD的治疗效果,探究MSCs是否通过TGF-β/Smad信号通路来改善CKD大鼠肾脏纤维化。方法:将45只体重在260g~280g之间的雄性SD大鼠,随机原则分为正常组、CKD模型组和MSCs干预组,每组15只大鼠;建模结束第3天按照2×10~6/kg的剂量尾静脉单次注射大鼠胫骨和股骨来源的骨髓MSCs(P3),正常组和模型组的大鼠同尾静脉注射入相等容积的无菌生理盐水对照。MSCs干预后早期处死所有大鼠,留取各组大鼠的血清检测血尿氮素(BUN)、血肌酐(CREA)评估肾功;HE、天狼星染色检测肾皮质小管损伤和胶原沉积;免疫组化检测细胞外基质成分Collagen I、CollagenⅢ表达变化以及肌成纤维细胞(α-SMA)活化的改变;Western Blot检测TGF-β/Smad信号通路中Smad2、Smad2/3、p-Smad3、p-Smad2/3蛋白表达变化及ELISA检测肾组织TGF-β含量变化。结果:模型组较正常组大鼠血清BUN、CREA水平显著上升,p0.05;HE、天狼星染色显示肾皮质小管损伤和胶原沉积明显;免疫组化检测细胞外基质成分Collagen I、CollagenⅢ和肌成纤维细胞(α-SMA)活化明显增加,p0.05。MSCs干预后血清BUN、CREA水平均显著降低,p0.05;MSCs干预组肾皮质小管损伤和胶原沉积明显减轻,p0.05;免疫组化检测显示MSCs干预组CollagenⅠ、CollagenⅢ和α-SMA明显减少,p0.05。ELISA检测肾脏组织中TGF-β含量结果显示,MSCs干预组肾组织TGF-β含量较模型组显著降低,p0.05。Western blot结果显示TGF-β/Smad信号通路中的相关蛋白表达变化。与正常组相比,模型组的Smad2、Smad2/3、p-Smad3、p-Smad2/3蛋白表达水平均显著升高,p0.05。MSCs干预后与模型组相比,肾组织Smad2、Smad2/3、p-Smad2/3蛋白表达水平均显著降低,p0.01。结论:MSCs能显著改善阿霉素和腺嘌呤联合诱导CKD大鼠肾脏胶原沉积、减轻细胞外基质成分和肌成纤维细胞表达以及改善肾功可能通过TGF-β/Smad信号通路改善慢性肾脏纤维化。

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