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《第十四届中国中西医结合基础理论学术年会会议资料》2018年
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补体C3a/C3aR在马兜铃酸肾病中的作用研究

钱知知  叶晶  朱思睿  张良  
【摘要】:目的:初步探讨补体C3a及其受体(C3aR)在马兜铃酸肾病中的作用,并探索其可能的作用机制。方法:①补体C3a/C3aR在马兜铃酸Ⅰ(AAI)致肾损伤中的表达分析。将健康6-8周龄C57BL/6小鼠随机分为:溶媒对照组、AAI(5.0mg·kg~(-1))组。给药35天,并分别在给药3d,7d,14d,21d,35d后采集动物肾、血等样本。检测小鼠血清中肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、C3和C3a等的含量;HE法染色观察肾脏病理组织学变化;免疫组织化学检测肾组织C3aR的表达水平和分布情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测AAI对C3aR蛋白表达水平的影响;RT-PCR法检测肾组织C3a、C3aR的mRNA水平的变化。②补体C3a/C3aR在马兜铃酸Ⅰ致肾损伤作用中的机制研究。健康6-8周龄C57BL/6小鼠随机分为:溶媒对照、AAI组(5.0mg·kg~(-1))、AAI+C3aRA组(5.0mg·kg~(-1)+0.1mg·kg~(-1))。给药14天,后检测小鼠血清中肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、C3和C3a等含量;HE染色观察肾脏病理组织学变化;免疫组织化学检测肾组织C3aR、IL-6、TNF-α、α-SMA、E-cadherin的表达水平和分布情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测AAI对C3aR、α-SMA、E-cadherin、TGF-β1、Bcl-2、Bax、Caspase3的表达影响;RT-PCR法检测肾组织C3a、C3aR、α-SMA、E-cadherin、TGF-β1的mRNA水平的变化。结果:(1)①与溶媒对照组相比,随着给药时间的延长,肾脏组织损伤程度加重;14天时小鼠血清C3含量最低,C3a含量最高;血清中IL-6、TNF-α含量总体呈上升趋势;肾组织中C3aR蛋白及mRNA表达变化先增多后降低,14天时含量最为显著,总体呈上升趋势;②与AAI组相比,给予C3aRA组的AAN模型小鼠血清肌酐、尿素氮、炎症因子(IL-6、TNF-α)和C3a显著降低病理和Masson结果显示肾脏损伤显著减轻,肾间质纤维化面积减少;肾组织中C3aR、炎症相关因子和纤维化指标(α-SMA、TGF-β1)的蛋白及mRNA表达明显下降,而E-cadherin蛋白及表达显著升高。结论:(1)补体C3a/C3aR在马兜铃酸肾病中表达增加,补体C3a是AAI致肾损伤重要因素,其可能参与急性马兜铃酸肾病的发生发展过程。(2)在马兜铃酸急性肾损伤过程中,补体C3a及其受体参与了马兜铃酸肾病的发生发展,其机制可能为:C3a与其受体结合后刺激肾小管上皮细胞释放促炎因子、促纤维因子、白细胞浸润诱导炎症反应,从而造成肾损伤。给予补体C3aR抑制剂能改善其肾功能、肾间质纤维化程度。
【作者单位】:南京中医药大学
【基金】:江苏高校优势学科建设工程资助项目(中西医结合)~~
【分类号】:R692

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